神经干动作电位及其传导速度的测定.doc

实验一神经干动作电位及其传导速度的测定
1.实验目的：应用微机生物信号采集处理系统和电生理实验的方法，测定蛙类坐骨神经干双相、单相动作电位，测定神经冲动的传导速度。
2.实验材料和方法：
⑴材料：蟾蜍；任氏液；BB-3G标本屏蔽盒，微机生物信号采集处理系统。
⑵方法：2.1系统连接和参数设置启动RM6240系统：点击“实验”菜单，选择“神经干动作电位”项目。仪器参数：1、2通道时间常数0.02s、滤波频率3kHz、灵敏度5mV，采样频率40～100kHz，扫描速度1.0ms/div。单刺激模式，刺激宽度0.1ms，延迟1ms，同步触发。
2.2制备蟾蜍坐骨神经干标本
2.2.1毁蟾蜍脑脊髓和下肢标本制备
2.2.2剥皮的下肢标本俯卧位于蛙板上，并剪除其骶骨。用玻璃分针分离脊柱两侧的坐骨神经，穿线，紧靠脊柱根部结扎，近中枢端剪断神经干，用尖头镊子夹结扎线将神经干从骶部剪口处穿出。
2.2.3用分针循股二头肌和半膜肌之间的坐骨神经沟，纵向分离暴露坐骨神经大腿部分，直至分离至腘窝胫腓神经分叉处，并用分针将腓浅神经、胫神经与腓肠肌和胫骨前肌分离。
2.2.4提起一侧结扎神经的线头，置剪刀于神经与组织之间，紧贴股骨，腘窝，顺神经走向，剪切至跟腱并剪断跟腱和神经。剥离附着在神经干上的组织，完成后将其浸入盛有任氏液培养皿中待用。
2.3实验观察
2.3.1神经干标本兴奋性将神经干移入标本屏蔽盒内，中枢端置于刺激电极处。在刺激器功能框，选中触发选项，选择单刺激，波宽0.1ms，刺激电压1.0V，按“开始刺激”，观察屏幕上是否有动作电位，若神经干标本兴奋性良好，继续下一项目。
2.3.2中枢端引导动作电位神经干末梢置于刺激电极处，刺激电压1.0V，波宽0.1ms，按“开始刺激”，测定第1对引导电极引导的双相动作电位正相波和负相波的振幅和时程。
2.3.3末梢端引导动作电位和测定动作电位传导速度神经干中枢端置于刺激电极处，刺激电压1.0V，波宽0.1ms，按“开始刺激”，测定第1对引导电极引导的双相动作电位正相波和负相波的振幅和时程。分别测量两个动作电位起始点的饿时间差和标本盒中两对引导电极之间的距离s（应测r1-r2的间距），计算动作电位传导速度。
2.3.4单相动作电位引导用镊子夹伤第一对引导电极之间的神经，刺激电压1.0V，波宽0.1ms，按“开始刺激”，使荧屏上的动作电位呈现一正相波。测量单相动作电位的振幅和动作电位持续时间。
2.3.5按一定步长，刺激强度从0V开始逐步增加，每改变一次刺激强度，按“开始刺激”，直至动作电位不再增大为止。测量与刺激电压对应的动作电位振幅。
3.实验结果：神经干兴奋传导速度的测定，如下图所示：神经干传导的速度为23.53m/s；
图中的上部分的波形图即为动作电位，正相波和负相波连在一起称为双相动作电位；下部分为测定神经冲动的示意图

4.实验讨论和结论：讨论：用电刺激神经，在负刺激电极下的神经纤维内外产生去极化，当去极化达到阈电位时，膜产生一次在神经纤维上可传导的快速电位翻转，此即动作电位；双相动作电位的形成机制：如果两个引导电极置于兴奋性正常的神经干表面，兴奋先后通过两个电极处，便引导出两个方向相反的电位波形，即为双相动作电位。动作电位在神经干上传导有一定的速度。不同类型的神经纤维传导速度不同，神经纤维越粗则传导速度越快。
结论：当刺激强度达到阈电位时会产生动作电位，而动作电位在神经干上传导有一定的速度。
5.参考文献：⑴陆源，林国华，杨午鸣，实验3神经干动作电位及其传导速度的测定，技能学实验教程（第二版），2010：98～101.