乳酸菌和酵母菌混合培养条件优化研究.doc

乳酸菌和酵母菌混合培养条件优化研究

摘要:对乳酸链球菌和酿酒酵母菌进行混合培养发酵，通过讨论溶氧、温度、pH值、接种量、接种比例和培养基对其发酵结束时活菌数的影响，确定两种菌在前期28℃摇床150r/min培养24h，后期37℃静置24h，初始pH为7.5，接种量为0.5%，接种比例乳酸菌∶酵母菌为1%∶0.5%，培养基为YEPD时，两者的活菌数水平达到最高值，乳酸菌达5．0×108CFU/mL，酵母菌达1．0×108CFU/mL。
关键词:混合培养;酵母菌;乳酸菌

StudyonOptimizationofMixedCultureConditionsforLacticAcidBacteriaandYeast

Abstract:LactococcuslactisandSaccharomycescerevisiaewerecultivatedandfermentedtogether，andtheimpactsofdissolved
oxygen，temperature，pHvalue，inoculumsize，inoculationproportion，andculturemediumonthenumberofviablecountatthe
endoftheirfermentationwereinvestigated．Theoptimizedmixedcultureconditionsforthesetwobacteriawereobtainedasfollows:
culturefor24hoursinshakerat150r/minat28℃inearlierperiod，stewingfor24hoursat37℃inlaterperiod，theinitialpH
valuewas7．5，theinoculumsizewas0．5%，theinoculationratiooflacticacidbacteriatoyeastwas1%∶0．5%，andtheculture
mediumwasYEPD．Undertheseconditions，thenumberofviablecountoflacticacidbacteriaandyeastreachedthehighestvalue，
being5．0×10
8
and1．0×10
8
CFU/mLrespectively．
Keywords:Mixedculture;Yeast;Lacticacidbacteria
乳酸菌和酵母菌对人类来说，是非常有益的微生
物菌种，人类在很早的时候就从大自然的变化中学到
了利用酵母菌进行酿酒、发面、制曲等工艺，利用乳酸
菌制作风味乳制品等。在现代化工艺生产中，越来越
多的用到了两种菌进行发酵，例如发酵豆粕、微生态制
剂等。但是对于两者混合培养发酵的报道还不是很
多，两者之间如果能够混合培养而且活菌数水平并不
下降的情况下，可以大大节约发酵能源消耗。本文通
过对2种菌混合培养条件的讨论，旨在为大规模生产
乳酸菌和酵母菌提供理论基础。
1材料与方法
1．1材料
1．1．1菌种乳酸链球菌(Streptococcuslactis)、酿酒
酵母菌(Saccharomycescerevisiae)均为河南微生物饲料
研究中心保藏。
1．1．2培养基MＲS液体培养基:胰蛋白胨1%、酵
母浸粉0．5%、葡萄糖2%、牛肉蛋白胨1%、吐温－80
1%、K
2
HPO
4
0．2%、结晶乙酸钠0．5%、柠檬酸三铵
0．2%、MgSO
4
·7H
2
O0．02%、MnSO
4
·4H
2
O0．005%，
pH值6．8，用于制备乳酸菌种子液;YEPD培养基:胰
蛋白胨2%、酵母浸粉1%、葡萄糖2%，用于制备酵母
菌种子液;乳酸优化培养基:酵母浸粉1%、葡萄糖
0．5%、结晶乙酸钠0．5%、柠檬酸三铵0．2%、吐温－80
1%、K
2
HPO
4
0．2%，用于混合培养时降低培养基成本;
酵母优化培养基:豆粕粉3%、玉米粉2%、麸皮1%、葡
萄糖3%，用于混合培养时降低培养基成本。以上培养
基均在121℃下灭菌20min。
1．1．3主要仪器设备立式高压灭菌锅、电子天平、
显微镜、超净工作台、恒温摇床、恒温培养箱、pH计、1
吨立式发酵罐。
1．2方法
1．2．1溶氧对混合菌体生长的影响在MＲS液体培
养基中按乳酸菌∶酵母菌为1∶1的比例接种，前期150r/
min震荡培养，后期静置培养，培养温度为30℃，总培
养时间为48h，震荡时间设8、16、24、32h4个处理，培
养完后分别检测乳酸菌和酵母菌的数量。
1．2．2温度对混合菌体生长的影响在MＲS液体培
养基中按乳酸菌∶酵母菌为1∶1的比例接种，前期150r/min震荡培24h，后期静置培养2