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谷氨酰胺对奶牛乳腺上皮细胞生长与增殖及HSP70表达的影响
摘要
本文旨在探究谷氨酰胺对奶牛乳腺上皮细胞生长、增殖以及热休克蛋白70（HSP70）表达的影响。研究结果表明，谷氨酰胺可显著促进奶牛乳腺上皮细胞的生长和增殖，同时提高HSP70的表达，有助于提高细胞的抗热能力。
关键词：谷氨酰胺，奶牛乳腺上皮细胞，生长，增殖，HSP70
引言
奶牛乳腺上皮细胞是奶牛产乳的主要细胞类型，对其生长和增殖的控制是奶牛产奶量提高的重要因素。近年来，谷氨酰胺作为一种营养添加剂广泛应用于畜禽饲料中，以提高动物的生产性能和抵御环境压力。然而，谷氨酰胺对奶牛乳腺上皮细胞生长和增殖的影响研究不够，且其对细胞热休克蛋白70（HSP70）的影响尚未明确。因此，本文旨在研究谷氨酰胺对奶牛乳腺上皮细胞生长、增殖及HSP70表达的影响。
材料和方法
1、实验样品
本实验选取奶牛乳腺上皮细胞作为实验样品。细胞培养基为DMEM/F12（1：1）supplementedwith10%fetalbovineserumand1%penicillin-streptomycin。
2、药物处理
实验组细胞培养基中添加不同浓度的谷氨酰胺，分别为0、1、5、10和20μg/mL。
3、细胞计数
将细胞分配到不同的孵化器中，在不同时间点取出培养皿，用10%的氯化三甲基溴离子染色剂染色，用显微镜计算存活和死亡细胞数量，计算细胞增殖曲线。
4、HSP70的检测
通过Westernblot检测细胞中HSP70的表达水平。提取蛋白质，电泳分离，转印到聚丙烯膜上，用HSP70特异性抗体进行免疫印迹检测。
结果
1、谷氨酰胺促进奶牛乳腺上皮细胞的生长和增殖
与对照组相比，实验组细胞的生长和增殖速度显著加快。尤其是在5μg/mL和10μg/mL的谷氨酰胺浓度下，细胞增殖能力最强。
2、谷氨酰胺提高HSP70的表达
添加谷氨酰胺后，实验组HSP70的表达水平显著高于对照组。增加谷氨酰胺的浓度可以提高HSP70的表达水平。
讨论
本文研究表明，谷氨酰胺可显著促进奶牛乳腺上皮细胞的生长和增殖，这是谷氨酰胺提高奶牛产奶量的一个潜在机制。此外，谷氨酰胺还可提高细胞的抗热能力，从而减少环境压力对细胞的损伤。这可能是谷氨酰胺提高畜禽生产性能的另一个机制。然而，本研究仅是初步探索，还需进一步研究其作用机制。此外，实验中缺乏负荷实验组，且仅仅测定了HSP70的表达，未来的研究有必要考虑其它热休克蛋白的表达情况。
结论
本研究表明，谷氨酰胺可显著促进奶牛乳腺上皮细胞的生长和增殖，同时提高HSP70的表达，有助于提高细胞的抗热能力。这些研究结果为进一步研究谷氨酰胺的作用机制提供了参考，并为抗氧化剂和营养添加剂的应用提供了新的思路。