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纳米银对粪肠球菌抗菌作用的实验研究 随着抗生素滥用导致耐药性菌株的不断出现,纳米材料作为一种新型的抗菌物质引起了广泛的关注。纳米银具有较强的抗菌活性,已经广泛应用于医疗、环境、食品等领域。本文旨在探讨纳米银对粪肠球菌的抗菌作用。 一、实验材料 实验用纳米银粒子纯度为99.5%,平均粒径10nm,生产厂家为XX公司;粪肠球菌形态为革兰氏阳性球菌,由医院提供。 二、实验方法 2.1纳米银分散液的制备 将纳米银粒子加入10mL双蒸水中,超声分散15min,室温下定容至50mL,得到10mg/mL浓度的纳米银分散液。 2.2粪肠球菌菌液的制备 粪肠球菌存储于市立医院实验室中,挑选一株新鲜的菌株接种于37℃恒温培养箱中的脑心肝培养基板上,于24h后收取菌液,放置于冰箱中备用。 2.3抑菌试验 在无菌条件下,制备不同浓度的纳米银分散液。取10μL不同浓度的纳米银分散液并加入100μL菌液中,于隔水加温梯度板中进行肉汤稀释法计数。菌液加入纳米银分散液后间隔1、3、5、10min取1mL菌液,过滤掉纳米银颗粒后进行沉淀法计数。分别于37℃和25℃下孵育24h,记录菌落形成情况,计算出每毫升菌液的击灭率。 三、实验结果 3.1纳米银分散液的制备 成功制备10mg/mL浓度的纳米银分散液,稳定性较好。 3.2粪肠球菌菌液的制备 成功制备出粪肠球菌菌液,浓度为10^7CFU/mL。 3.3抑菌试验 (1)不同浓度纳米银分散液对粪肠球菌击灭率随着纳米银浓度的升高而增大,各组间差异显著(P<0.05)。 (2)随着孵育时间的延长,粪肠球菌抵抗纳米银浓度的能力逐渐增强,且在较高浓度纳米银的作用下也有少量菌落生长。 (3)随着纳米银处理时间的延长,粪肠球菌击灭率逐渐增大,且在5min和10min时抑菌效果最佳,5min时粪肠球菌CFU数几乎清零。 四、实验结论 实验发现,纳米银对粪肠球菌具有一定的抑制作用,其抑菌效果随着纳米银浓度增加而增强,随着孵育时间的延长和在较高浓度纳米银处理下,粪肠球菌抵抗力逐渐增强,但随着纳米银处理时间的加长其抑菌效果越来越明显。 综上所述,纳米银具有较强的抑菌效果,可作为一种新型的抗菌物质。但因为纳米材料的生物毒性有待长期验证,所以需要进一步开展安全性评价及临床应用研究。