中华绒螯蟹性腺抑制激素纯化及其免疫定位的研究.docx

中华绒螯蟹性腺抑制激素纯化及其免疫定位的研究
中华绒螯蟹性腺抑制激素纯化及其免疫定位的研究
摘要：
学术研究表明，性腺抑制激素在动物的生育调节中发挥着重要的作用。本论文以中华绒螯蟹为研究对象，旨在纯化其性腺抑制激素并进行免疫定位。首先，通过超滤、毒素吸附、硫酸铵分级沉淀等步骤，得到了初步纯化的中华绒螯蟹性腺抑制激素。然后，运用SDS-PAGE滤膜法分离鉴定，获得了纯化性腺抑制激素的部分氨基酸序列。
接着，进行了免疫定位实验。首先，利用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离纯化性腺抑制激素，将其蛋白分离到PVDF滤膜上。然后，采用Westernblotting技术将细胞接种之后的免疫球蛋白与蛋白共价合并。最后，通过化学发光检测方法检测成份并进行分析。
实验结果表明，所提取的中华绒螯蟹性腺抑制激素具有较高的纯度，免疫定位实验证实了该激素在中华绒螯蟹体内的存在，并可作为相关性腺激素调节通路的生育控制指标。
关键词：中华绒螯蟹，性腺抑制激素，纯化，免疫定位
Abstract:
Researchhasshownthatsexhormoneinhibitorsplayanimportantroleinregulatinganimalfertility.ThispaperfocusesontheChinesemittencrab,aimingtopurifyitssexhormoneinhibitorandperformimmunelocalization.Firstly,throughultrafiltration,toxinabsorption,ammoniumsulfatefractionalprecipitationandothersteps,preliminarypurificationofChinesemittencrabsexhormoneinhibitorwasobtained.Then,SDS-PAGEfilterfilmmethodwasusedtoseparateandidentifypurifiedsexhormoneinhibitors,andpartoftheaminoacidsequencewasobtained.
Next,animmunelocalizationexperimentwasconducted.Firstly,purifiedsexhormoneinhibitorswereseparatedbypolyacrylamidegelelectrophoresisandproteinwasseparatedontoaPVDFfilm.Then,theimmunoglobulinaftercellinoculationwascovalentlycombinedwithproteinusingWesternblottingtechnology.Finally,chemicalluminescencedetectionmethodwasusedtodetectthecompositionandconductanalysis.
TheexperimentalresultsshowedthatthesexhormoneinhibitorextractedfromtheChinesemittencrabhashighpurity,andtheimmunelocalizationexperimentconfirmedtheexistenceofthishormoneintheChinesemittencrab,whichcanbeusedasafertilitycontrolindexforrelatedgonadotropinregulationpathways.
Keywords:Chinesemittencrab,sexhormoneinhibitor,purification,immunelocalization