安捷伦液相基本操作ppt课件.ppt

安捷伦液相的基本操作目录
一.色谱基础知识
二.Agilent液相色谱仪基本操作
三.常见色谱故障
1.色谱法的分离原理
溶于流动相(mobilephase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationaryphase)发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。2.HPLC的特点和优点流动
相瓶进入工作站主界面编辑完整方法仪器方法设置仪器方法设置序列样品：命名与序列表设置数据分析数据分析常见色谱故障----基线噪音
可能原因:a、检测池脏
b、检测池灯能量下降
c、由泵引起的脉冲
d、检测器上的温度效应
e、检测其中有气泡通过
常见色谱故障----基线漂移
可能原因:a、梯度洗脱所用溶剂有吸收
b、流动相脏
c、色谱柱没有用流动相平衡
d、系统中污染物溢出
e、实验温度不稳定
常见色谱故障----拖尾峰可能原因：a、柱效降低或有柱塌陷b、进样体积过大c、柱外扩散效应d、碱性基质与硅羟基作用e、重金属反应
常见色谱故障----前伸峰
可能原因：a、色谱柱过载b、进样体积过大c、大峰之前有未彻底分离
的小峰常见色谱故障----负峰可能原因：a、样品吸收比流动相吸收小b、溶解样品的溶剂通过色谱柱平衡被破坏c、示差检测器中最常见，溶质的折光指数小于溶剂的折光指数。常见色谱故障----鬼峰
常见原因是流动相脏，尤其是水相。要求使用超纯水，最多两天就换

常见色谱故障----双峰
可能原因：a、柱头塌陷或柱床运动
b、柱前滤芯堵塞
c、组分共流出
d、样品量过大
f、进样器的进样流路存在分叉流路
常见色谱故障----峰扩展
可能原因：a、柱效降低或有柱塌陷
b、进样体积过大
c、流动相粘度大谢谢！