肿瘤侵袭转移实验技术.ppt

目录一、概述二、细胞划痕实验实验优点：
1.在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程。
2.适合研究细胞与胞外基质（ECM）、细胞与细胞之间相互作用引起的细胞迁移。
3.与包括活细胞成像在内的显微镜系统兼容，可用于分析细胞间的相互作用。
4.研究细胞迁移的体外实验中最简单的方法。实验材料：
细胞样品
仪器、耗材：6孔板marker笔直尺枪头
试剂、试剂盒：无血清培养基、PBS
4.每孔加入5X105个细胞并培养约24h
注：1.数量以过夜贴壁能铺满为宜，适当调整
2.数量少时可培养一段时间至铺满板底

5.用1ml枪头垂直于孔板和线制造细胞划痕，尽量保证各个划痕宽度一致

注：.人工枪头制造划痕难以保证划痕宽度的一致性，影响实验结果，这也是该方法最大的缺陷
6.吸掉旧培养基，用无菌PBS冲洗细胞3次，去除划下的细胞后，再加入无血清培养基，根据需要设加实验组、对照组。

注：冲洗时温柔，贴壁加入，避免冲掉单层细胞7.放入37度5%CO2培养箱，培养。按0，（6），12，24小时取样，拍照。新：德国IBIDI（易必迪）技术谈几点问题：
1.细胞的选择：一般适用于上皮，纤维样细胞系
a.本身有迁移能力，且较强。
b.有极性，方便测量，观察。
c.对无血清有较强的忍受力。
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