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一株产高温纤维素酶真菌的筛选、鉴定及酶学性质研究 摘要 本研究旨在从自然环境中筛选出一株产高温纤维素酶真菌,并分析鉴定其分类学身份,并研究其酶学特性。结果显示,该真菌具有极高的纤维素酶活性,其最适温度为75℃,最适pH为5.5。此外,该真菌在不同培养基条件下,产酶量存在显著的差异。酶学特性信息的解析为这种酶的进一步应用提供了基础理论支持。 关键词:高温纤维素酶、真菌,酶学特性 引言 纤维素是一种广泛存在于自然界中的多糖,是植物细胞壁的重要构成物质。全球每年产生的纤维素衍生物数量达1.2亿吨。然而,由于其酶解过程需要特定的温度、压力和pH等条件,因此纤维素的利用一直没有得到广泛的应用。因此,寻找高效的纤维素酶在此过程中具有重要的现实意义。 真菌是纤维素酶的重要来源之一。在自然界中,有些真菌可以在高温下生存并产生纤维素酶。因此,本研究的目的是从自然环境中筛选出一株产高温纤维素酶真菌,并研究其酶学特性。 材料和方法 样品的采集和富集: 土壤样品在室温下表面消毒3分钟,并分别接种在含有纤维素的酵母氮碳平板上,经过12h的增殖后,逐渐转移到不同的含有纤维素液体培养基中真菌分离、筛选: 从液体培养基上选择菌落形态独特、生长快速的菌株,筛选出可产生纤维素酶的真菌。酶学特性研究:选出的真菌分别在不同的培养条件下进行培养,以测定影响纤维素酶产量变异的最佳条件。纤维素酶的酶学特性包括温度、pH和阳离子对酶活性的影响。 结果 真菌鉴定和筛选:从液态培养基上筛选到14个不同的真菌株。通过形态学、分子生物学和基因序列分析,确定了一株产高温纤维素酶的真菌为Trichodermareesei。 酶学特性:在生长12天下,研究了T.reesei在不同培养条件下的产酶活性情况。结果显示,菌株在麦芽汁培养基中产酶最高。酶的最适温度为75℃,最适pH为5.5。阳离子中钙离子对该酶的活性影响最大。 结论 本研究筛选出一株产高温纤维素酶的真菌Trichodermareesei,并通过酶学特性研究,确定该真菌最适温度为75℃,最适pH为5.5。显著的酶活性中阳离子中钙离子对该酶的影响最大。这为高效纤维素酶的开发和利用提供了理论依据。将来可以通过该酶的进一步研究来探究酶的分子机制和进一步提高酶的催化效率。