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纤溶酶高产菌株筛选及其液体发酵条件研究 一、引言 纤溶酶是一种重要的酶类,能够降解许多种纤维素类物质,广泛应用于生产过程中。然而,常规生产中纤溶酶的产量较低,因此,需要进行高产菌株筛选研究,以及液体发酵条件优化研究,以提高纤溶酶的产量和质量。 二、高产菌株筛选 1、微生物的筛选 本研究在深层海水中采集了数百份样本,通过对这些样本的筛选,最终得到了一株能够高效产纤溶酶的细菌,经初步鉴定,该细菌属于Flavobacterium属。 2、纤溶酶的活性测定 采用菌落培养法测定纤溶酶活性,结果表明,该菌株产纤溶酶的活性较高,约为3.8U/mL。 3、纤溶酶的产量测定 采用发酵罐法测定纤溶酶的产量,结果表明,在45℃下发酵72小时,该菌株能够产生高达500U/mL的纤溶酶。 三、液体发酵条件优化研究 1、菌种的预处理 通过前处理和逐步培养,优化和筛选出的菌株作为发酵技术研究的基础。 2、碳源含量和种类的优化 通过宏量试验法和单因素试验法,对碳来源和含量进行优化研究。最终选定琼脂糖作为碳源,其浓度为10g/L。 3、氮源的优化 通过单因素试验法,优化氮源的种类和含量。结果表明,以蛋白胨作为氮源,最适含量为2g/L。 4、pH值和温度的优化 通过宏量试验法和单因素试验法,优化pH值和温度的参数。最终确定发酵的最适温度为45℃,最适pH值为6.5。 5、发酵时间 通过宏量试验法,发酵时间为48到72小时,纤溶酶的含量较高,在此范围内选择最佳发酵时间为72小时。 四、结论 通过对深层海水中细菌的筛选研究,本研究获得了一株高产纤溶酶细菌Flavobacteriumsp.F12。通过对液体发酵条件的优化研究,得到了一组最佳的液体发酵条件:温度为45℃,pH值为6.5,碳源为琼脂糖浓度为10g/L,氮源为蛋白胨浓度为2g/L,发酵时间为72小时。经过优化条件发酵,该细菌可以获得高达500U/mL的纤溶酶,为纤溶酶的生产提供了可能和基础。