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不同因子对苜蓿悬浮培养细胞皂苷合成影响的研究
引言
悬浮培养细胞是一种较为常见的纤维素水解产物的生产方法，而苜蓿作为一种优质乾草，含有较高数量的三萜皂苷，被广泛用于悬浮细胞培养过程中作为代谢物，产生的皂苷具有广泛的生理功能。而对于悬浮培养细胞生产皂苷，因素有很多，影响也很大。本文将就不同因子对苜蓿悬浮培养细胞皂苷合成的影响进行探讨。
材料与方法
1.材料
以苜蓿为原料收集而来的悬浮培养细胞；皂苷提取设备及试剂；RPMI1640培养基（含10%胎牛血清）；不同重金属离子液体
铜离子（Cu2+）、镉离子（Cd2+）、汞离子（Hg2+）。
2.方法
2.1确定最佳培养条件
在72孔板中加入不同浓度的苜蓿悬浮培养细胞（即5×104、1×105、2×105、4×105和8×105个/ml），并分别将其培养在5%CO2的恒温培养箱中。接下来将培养基替换为含有不同浓度RPMI1640培养基的液体（即10%、20%、30%、40%和50%），并在37°C、5%CO2的条件下培养72h，该依次确定最佳的细胞密度和培养基含量条件。
2.2研究重金属离子对皂苷合成的影响
取出不同浓度的悬浮细胞(约5×10^5个/mL)后加入到2mL的皂苷基质液中（含6%鲍鱼精酶）。接下来按不同重金属离子液的种类和浓度来设定处理组和对照组，然后将其分别放置在37°C水浴中反应24h。反应结束后，根据测得的皂苷含量排列处理后的数据，比较重金属离子对皂苷合成的影响。
结果
1.确定最佳培养条件
根据试验结果可得出，当培养基的浓度为40%、细胞浓度为1×105、温度为37°C时，悬浮培养细胞的皂苷合成指数最高。
2.研究重金属离子对皂苷合成的影响
根据所得结果可得知，不同重金属离子对皂苷合成有不同的影响。包括铜离子(Cu2+)在内的金属离子都会显著促进皂苷的合成。同时，高浓度的镉离子(Cd2+)可能会抑制皂苷的合成，而汞离子(Hg2+)对皂苷合成没有显著影响。
讨论
研究发现，在悬浮培养细胞条件下，不同因素对皂苷合成具有很大影响，其中培养基浓度、悬浮细胞密度和清除能力等因素如实反映了培养细胞的生长状况，还发现重金属离子对皂苷合成有不同的影响，特别是在高浓度后镉离子的抑制效应更为明显。
结论
在本研究中，我们通过对苜蓿悬浮培养细胞皂苷合成的影响进行研究，发现了不同因素对该过程的影响。我们的研究结果可用于优化悬浮培养细胞的生长条件，最终产出更多的皂苷，同时，也为理解皂苷的合成机理提供了有价值的参考。