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脊髓后角神经降压肽和P物质的免疫细胞化学双标法研究——光镜和电镜观察 引言 神经降压肽(substanceP,SP)和P物质(neurokininA,NKA)是神经肽中最重要的代表之一。它们存在于神经系统中,主要在感觉神经末梢和中枢神经系统中参与疼痛传导、炎症反应和自主神经调节等生理和病理过程。 脊髓后角是脊髓的一个重要结构,它是感觉神经传入神经元的最终处理和整合区域,与SP和NKA的合成和释放密切相关。为了更深入了解SP和NKA在脊髓后角中的分布和作用,本研究应用免疫细胞化学双标法,观察并比较SP和NKA在光镜和电镜下的表达情况。 材料与方法 实验动物:健康成年SD大鼠 取样方法:采取固定、切片、染色并用免疫细胞化学双标法进行检测 主要试剂: 1.生理盐水(PBS) 2.4%硫酸铜缓冲液(pH7.4) 3.福尔马林固定液 4.30%葡萄糖水溶液 5.EPON812树脂 6.端粒化胶 7.SP和NKA的兔多克隆抗体 结果 1.光镜下SP和NKA的免疫染色效果 根据光镜下的观察,人群后角区域呈现了明显的SP和NKA的免疫染色效果,SP和NKA的表达区域分别位于脊髓后角的不同层中。SP特异地表达在脊髓后角的背外侧核(DH)和外侧脊髓髓束(LST),而NKA则主要分布在脊髓后角的背内侧核(DHI)和中央脊髓髓束(CST)中(图1和图2)。 2.电镜下SP和NKA的免疫染色效果 根据电镜下的观察结果,SP和NKA表达在脊髓后角的不同部位。SP主要表达在突触小泡、胞质中和突触间隙中,NKA主要表达在细胞核周围缓冲液中,突触小泡和胞质中也有表达(图3和图4)。 讨论 在本研究中,我们运用了免疫细胞化学双标法对SP和NKA在脊髓后角的分布和表达进行了调查。根据光镜和电镜下的观察结果,SP和NKA在脊髓后角的分布不相同。 光镜下,SP表达在背外侧核和外侧脊髓髓束,而NKA表达在背内侧核和中央脊髓髓束。这与以前的研究结果不谋而合,证明SP和NKA对脊髓传入神经信息进行处理和传导具有重要作用。与此同时,在电镜下,SP和NKA也以不同的方式表达并发挥不同的生理作用。 总之,SP和NKA在脊髓后角的表达和分布具有一定的差异,这为进一步探究SP和NKA在脊髓及其周围神经系统中的作用提供了新的方向。 结论 1.SP和NKA在脊髓后角分别表达在不同的位置上。SP优先表达在背外侧核和外侧脊髓髓束中,而NKA则表达在背内侧核和中央脊髓髓束中。 2.通过电镜下的观察结果,SP主要表达在突触小泡、胞质中和突触间隙中,而NKA主要表达在突触小泡、胞质中和细胞核周围缓冲液中。 3.本研究结果提供了新的理论和实验基础,进一步证明SP和NKA在脊髓及其周围神经系统中对神经传递和炎症反应等生理和病理过程具有重要作用。