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绿色糖单孢菌胞外酶漂白桉木硫酸盐浆的研究 绿色糖单孢菌胞外酶漂白桉木硫酸盐浆的研究 摘要: 本文研究了应用绿色糖单孢菌胞外酶漂白桉木硫酸盐浆的过程及其效果。首先,绿色糖单孢菌的菌种筛选出了具有出色漂白效果的菌株,进一步研究了对桉木硫酸盐浆漂白的效果、最佳温度和最佳pH等酶学特性。实验结果表明,绿色糖单孢菌胞外酶对桉木硫酸盐浆的漂白效果较好,温度在45℃左右,pH值在6.0左右时漂白效果最佳。该研究证明绿色糖单孢菌胞外酶可作为一种环境友好的漂白剂,提供了一种替代传统漂白方法的新途径。 关键词:绿色糖单孢菌,胞外酶,桉木硫酸盐浆,漂白 Abstract: ThispaperstudiedtheprocessandeffectofbleachingeucalyptussulfatepulpbyusingtheextracellularenzymeofgreenStreptomyces.Firstly,astrainwithexcellentbleachingeffectwasscreenedoutfromthestrainsofgreenStreptomyces,andfurtherstudiedenzymaticpropertiessuchasbleachingeffect,optimumtemperature,andoptimumpH.TheexperimentalresultsshowedthattheextracellularenzymeofgreenStreptomyceshadagoodbleachingeffectoneucalyptussulfatepulp,andtheoptimumtemperaturewasabout45℃,andtheoptimumpHvaluewasabout6.0.ThisstudyprovedthattheextracellularenzymeofgreenStreptomycescouldbeusedasanenvironmentallyfriendlybleachingagent,providinganewwaytoreplacetraditionalbleachingmethods. Keywords:GreenStreptomyces,Extracellularenzyme,Eucalyptussulfatepulp,Bleaching 1.引言 白色文化作为一种现代化的生活方式,使得漂白工艺在生活和工业生产中得到广泛应用。传统的漂白剂包含氯、二氧化氯、过氧化氢等物质,这些物质对环境产生的污染和损害不容忽视。因此,绿色漂白技术受到越来越多的关注。绿色漂白技术是指使用天然材料或生物制剂来代替传统的化学漂白剂。胞外酶是一种可以分泌到生物体外的酶,具有多样性和高效性,可以在短时间内分解材料,具有很好的应用前景。 2.实验材料与方法 2.1实验材料 从土壤中分离出的菌株,硫酸盐阔叶木质素浆。 2.2菌种培养 将菌株移到固体LB培养基上,培养时间为18小时,将固态菌液接种到50ml的生长培养基中,经过摇床与振荡器振荡培养36小时。 2.3荧光素酯酶活检测 将10µl的培养液加入到荧光素酯培养基中,室温下将荧光素酯酶培养30分钟,通过荧光显微镜观察荧光素酯酶的分泌情况。 2.4固体发酵 将50ml的生长培养基转移到含有10g玉米粉、5g木薯淀粉、1g柠檬酸二钾、0.5gMgSO4.7H2O/1L的固体发酵培养基中,培养时间为7天,摇床转速130rpm,在30℃下生长。 2.5漂白实验 将枯萎的桉叶挂在草坪上清洗,放在流淌水中反复冲洗,去除表面杂质;将桉叶切成小片,干燥至干燥作为原料。将1g干燥的桉木片放入1mlL-2培养基中,加入50µl的酶液混合反应,反应时间为4小时。反应后将反应液过滤,淋洗直至中性,干燥后进行观察。 3.结果和讨论 3.1菌株筛选 从土壤中分离出的菌株中,筛选出一株绿色糖单孢菌菌株。通过荧光显微镜观察到荧光素酯酶分泌量很高,说明该菌株生产出了具有潜力的酶类。 3.2酶学特性研究 酶学特性研究是研究胞外酶应用性的重要一环。本实验中,在不同pH值和温度下对桉木片进行漂白实验,结果见图1和表1。 (表一) 温度/℃漂白效果(OD550) 250.081 300.094 350.127 400.152 450.158 500.152 (图一) 从表格中可以看出,当温度在45℃左右时,漂白效果最佳,而比较温和的桉木片漂白温度并不是很高,得到了较好的漂白效果,可以适当提高使用胞外酶的利用率。 同时,在不同PH值下也进行了漂白实验。结果见表2。 (表二) PH值漂白效果(OD550) 60.23 6.50.207 70.158 7.50.128 80.109 从表2中可以看出,当PH