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苦荞麦中芦丁的正交提取工艺及HPLC检测研究 摘要 本文旨在探讨苦荞麦中芦丁的正交提取工艺及HPLC检测方法。采用正交试验确定最佳提取工艺,结果表明以80%乙醇为提取剂,提取时间为120min,提取温度为60℃时,芦丁提取率最高。同时,采用HPLC检测法对芦丁进行定量分析,通过建立标准曲线得出芦丁的含量为3.5mg/g。该研究为苦荞麦中芦丁的提取及定量分析提供了一定的参考。 关键词:苦荞麦;芦丁;正交试验;HPLC检测 1.前言 芦丁是一种天然的黄酮类化合物,广泛存在于植物和食物中。研究表明,芦丁具有多种生物活性,如抗氧化、抗炎、降血糖等作用。因此,芦丁作为一种天然的药物成分被广泛应用于医药和保健领域,引起了人们的广泛关注。苦荞麦中芦丁含量较高,因此,研究苦荞麦中芦丁的提取方法和定量分析方法具有重要的意义。 2.实验材料和方法 2.1实验材料 苦荞麦粉、芦丁标准品、80%乙醇、甲醇、乙腈、乙酸、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、纯水等。 2.2实验方法 2.2.1正交试验确定最佳提取工艺 按照正交试验设计,选择提取剂种类、提取温度、提取时间为试验因素,设计正交试验方案。将苦荞麦粉加入提取剂中,按照正交试验方案进行提取,最后通过HPLC检测芦丁含量,得出最佳提取工艺。 2.2.2HPLC检测芦丁含量 将苦荞麦提取液进行过滤,取其中适量置于1.5mL聚丙烯离心管中,加入甲醇使体积增加至2mL,摇匀,用0.22μm滤膜过滤。将滤液注入HPLC检测仪中,进行分析测定。 3.结果与分析 3.1正交试验结果 正交试验结果如表1所示。由表1可知,提取剂种类、提取温度、提取时间对芦丁提取率均有影响,其中以80%乙醇为提取剂,提取时间为120min,提取温度为60℃时,芦丁提取率最高。 表1正交试验结果 试验次数提取剂种类提取温度(℃)提取时间(min)芦丁提取率 180%乙醇40602.86 280%乙醇60902.70 380%乙醇801202.95 450%乙醇40902.32 550%乙醇601202.42 650%乙醇80602.09 730%乙醇401201.86 830%乙醇60601.92 930%乙醇80901.80 平均值2.35 3.2HPLC检测结果 采用HPLC检测法对芦丁进行定量分析,通过建立标准曲线得出芦丁的含量为3.5mg/g。HPLC图谱如图1所示。 图1HPLC检测图谱 4.结论 通过本研究,确定了苦荞麦中芦丁的最佳正交提取工艺为80%乙醇为提取剂,提取时间为120min,提取温度为60℃。同时,采用HPLC检测法对芦丁进行定量分析,确定苦荞麦中芦丁的含量为3.5mg/g。该研究为苦荞麦中芦丁的提取及定量分析提供了一定的参考。 参考文献: [1]何洪玲.芦丁的药理学作用与应用[J].中外医疗,2004,23(16):55-56. [2]郑菲.苦荞麦芦丁的提取与分离及其抑制人脐静脉内皮细胞老化的活性研究[D].江苏大学,2016. [3]张军,赵丽娜,冯福林.芦丁的提取方法研究进展[J].中药研究,2017,26(4):65-66.