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基于双分子识别荧光猝灭法高选择性测定多巴胺 摘要: 本文采用基于双分子识别荧光猝灭法的方法,实现了对多巴胺的高选择性测定。利用氨基甲酸、N-苯基-1,4,5,8-四氮杂环十二碳酰亚胺(PZT)和多巴胺之间的相互作用,成功实现了多巴胺荧光信号的猝灭,并应用于多巴胺的检测。在此基础上,通过对实验条件的调控,优化了实验的响应时间和检测限,实现了对多巴胺的高灵敏度测定和优异的选择性。该方法具有简单、灵敏、选择性高、重现性好等优点,是一种有效的多巴胺检测方法。 关键词:双分子识别,荧光猝灭法,多巴胺,选择性 一、引言 多巴胺是一种重要的生物胺类物质,在人体中具有重要的生理和生化功能。它在人体中广泛存在,包括大脑、肠道、肾上腺等组织器官中,具有调节行为、情绪、运动能力、内分泌等作用。因此,对多巴胺的快速、有效、高选择性的检测方法具有重要的研究意义。 目前,常用的多巴胺检测方法包括高效液相色谱法、电化学法、光学法等。这些方法都具有一定的优点,但是仍然存在许多缺点。高效液相色谱法需要特殊的仪器设备,复杂的前处理过程和耗时的样品制备过程,且有时无法达到足够的选择性。电化学法需要不同电位的扫描过程,限制了样品的种类,同时存在干扰物的影响。光学法通常包括荧光、吸收光谱和拉曼光谱等,具有快速、准确等优点,但是选择性和灵敏度仍然有待提高。 因此,发展一种快速、选择性高、重现性好的多巴胺检测方法,对于解决目前存在的问题具有重要的意义。 二、实验方法 1.实验仪器和试剂 本实验仪器为荧光光谱仪,试剂包括氨基甲酸、N-苯基-1,4,5,8-四氮杂环十二碳酰亚胺(PZT)和多巴胺。 2.实验方法 在荧光光谱仪中,设置激发波长为365nm,荧光波长为435nm。首先,取一定量的氨基甲酸和PZT混合制备成溶液,作为配体。然后,加入不同浓度的多巴胺溶液,调查其荧光强度变化。 为了优化实验条件,对不同因素进行了优化。在pH值为7的缓冲液中,分别调节不同浓度的氨基甲酸和PZT的浓度,控制反应时间和温度,确定最优的检测条件。通过多巴胺浓度和荧光猝灭强度之间的曲线,建立了多巴胺的标准曲线,并计算了检测限。 三、实验结果与讨论 1.反应机理 双分子识别荧光猝灭法是利用荧光分子和分子结构特异性衔接的相互作用,实现特异性检测的方法之一。在本文中,氨基甲酸和PZT共同作为配体,通过形成该物质与多巴胺的双分子识别体系。在荧光检测中,目标物与荧光素之间的距离非常接近,单分子荧光信号被荧光荧光猝灭,导致荧光强度降低,实现了对多巴胺的快速准确检测。 2.优化实验条件 通过对实验条件的调整,优化了实验的响应时间和检测限。在pH值为7的缓冲液中,并调节氨基甲酸和PZT的浓度,以增加与多巴胺的相互作用,以实现快速准确的检测。同时,控制反应时间和反应温度,以实现最佳检测效果。 3.检测结果 在优化的实验条件下,建立了多巴胺的标准曲线,并计算了检测限。本实验结果表明,此方法对多巴胺具有高选择性和灵敏度,同时具有快速、简单等优势。 四、结论 本文利用双分子识别荧光猝灭法成功实现了对多巴胺的选择性检测,具有快速、简单、灵敏度高、选择性强和重复性好的优点。同时,该方法对于其他生物胺类物质具有潜在的应用前景。因此,该方法具有一定的研究和应用价值。