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哈茨木霉高产几丁质酶菌株的筛选及产酶条件研究
摘要：
几丁质酶广泛存在于天然环境中，可以通过许多微生物的分泌物溶解干燥的壳类动物和昆虫外骨骼，具有重要的生物学和工业应用。本研究以哈茨木霉为研究对象，利用接种和筛选的方法从自然环境中分离到高产几丁质酶的菌株。通过对产酶条件的优化，如pH值、温度、碳氮源的种类、浓度和质量比等的调节，探究了影响几丁质酶产酶的主要因素。实验结果表明，优化的产酶条件可以显著提高几丁质酶的活性和产量，为工业化几丁质酶生产提供了可行的方案。
关键词：哈茨木霉，几丁质酶，产酶条件，菌株筛选。
引言：
几丁质酶是一类用于降解几丁质的酶，具有广泛的生物学和工业应用。随着环境保护意识的增强，绿色生产技术受到了越来越广泛的关注，几丁质酶也成为了生物工业中的重要酶类。目前，几丁质酶的生产主要以微生物为基础，其中又以酵母和真菌为主要生产菌株。哈茨木霉是一种土壤中广泛存在的真菌，分离自自然环境的哈茨木枝壳，并具有高效的几丁质酶产生能力。因此，对哈茨木霉的筛选和产酶条件的优化具有重要意义。
材料与方法：
1.菌株筛选：
自然环境中，分离自哈茨木枝壳的真菌样品通过去污染、接种基质和分离纯化等方法制备菌株。通过将筛选出来的菌株中几丁质酶的活性与效果进行比较，筛选出高产几丁质酶的哈茨木霉菌株。
2.优化产酶条件：
通过对哈茨木霉菌株的生物学和生化特性的分析，探究最适产酶条件。通过改变产酶环境参数，如pH值、温度、碳氮源的种类和质量等，确定影响几丁质酶产酶的主要因素以及最适产酶条件。
3.酶活性测定：
酶活性测定主要采用国家标准测定方法，即利用国际酶学联合会（IUB）对几丁质酶的测定方法。将测定样本和稀释辅助试剂按比例混合，加入定量线性浓度待测样本进行反应。经过反应相互作用后，通过计算活性单位，检测几丁质酶的活性。
结果与分析：
1.哈茨木霉高产几丁质酶菌株的筛选：
通过筛选分离自自然环境的真菌菌株，最终确定了一种高效产酶的哈茨木霉菌株。经过比较，确定了该菌株的最适产酶条件。
2.几丁质酶产酶条件的优化：
通过对影响几丁质酶产酶的环境因素进行调节，最优化产酶条件为：pH值为6.5，温度为30℃，碳源为葡萄糖+琼脂，质量比为5:1。
3.酶活性测定结果：
经过优化产酶条件后，酶活性显著提高，并且在最优化产酶条件下酶活性达到最高峰，提高了几丁质酶的产量。
结论：
本研究通过对哈茨木霉的筛选和产酶条件的优化，成功地获得了高效的几丁质酶产生菌株。通过优化产酶条件，酶活性显著提高，为工业化几丁质酶生产提供了可行的方案。本研究对于几丁质酶的研发和应用具有重要的意义。
参考文献：
1.Bartnicki-Garcia,S.(1987).Chitinandthesynthesisoffungalcellwalls.In:G.T.ColeandH.C.Hoch,eds.,TheFungalSpore.NewYork:JohnWileyandSons.
2.R.R.Lapenna,M.O.deAlmeidaFranca,A.M.Peralta,S.L.deAraujo&A.C.Monteiro(2011)Theexplorationofnewsourcesfortheproductionofchitinasebymicroorganisms,LettersinAppliedMicrobiology,52(3):236-242.