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中国农业科学2009,42(1):267-273 ScientiaAgriculturaSinicadoi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.01.034 猪TAF7基因的克隆、染色体定位和组织表达谱分析 张兴举,唐中林,王志伟,杨述林,牟玉莲,崔文涛,马月辉,储明星,李奎 (中国农业科学院北京畜牧兽医研究所/中国农业科学院家养动物遗传资源与种质创新重点开放实验室,北京100193) 摘要:【目的】通过对猪TAF7基因初步的研究,为猪分子遗传育种提供基础分子生物学信息,为猪的遗传育 种提供分子标记。【方法】以五指山猪为研究对象,克隆TAF7基因,分析该基因结构特点,然后利用IMpRH(the INRA-UniversityofMinnesotaporcineradiationhybrid,法国农业科学院-明尼苏达大学的辐射杂种克隆板) 分析该基因在猪染色体上定位信息,利用半定量RT-PCR方法,分析该基因在成年五指山猪16个不同组织(心脏、 背肌、淋巴、脾脏、肝脏、肾脏、肺脏、子宫、睾丸、胃、小肠、大肠、卵巢、胸腺、脑、脂肪)的表达谱信息。 【结果】克隆得到长1701bp的五指山猪TAF7基因序列,其中包括1050bp完整CDS(CodingSequence,编 码序列)区域,分析表明其编码含349个氨基酸的蛋白质。利用IMpRH分析结果表明,猪TAF7基因与分子标记 SW1879和IL4(interleukin-4,白细胞介素-4)紧密连锁,LOD(LimitofDetection,检测极限)值分别为6.69 和6.15。组织表达谱分析结果显示该基因在大多数组织中均有表达,其中在睾丸表达量较高,而在心脏、背肌中 表达很低。【结论】猪TAF7基因5’UTR中有一个短的内含子,而在该基因CDS区域没有内含子。猪TAF7蛋白序列 与人TAF7蛋白序列的相似性较高,二者在生物系统发育树中的距离最接近。猪TAF7基因在大多数组织中均表达, 在猪睾丸中表达量较高,证实它调节目的基因转录具有广泛性。 关键词:猪TAF7基因;克隆;基因定位;组织表达谱 Cloning,MappingandTissueExpressionProfileofPorcineTAF7Gene ZHANGXing-ju,TANGZhong-lin,WANGZhi-wei,YANGShu-lin,MUYu-lian,CUIWen-tao,MAYue-hui, CHUMing-xing,LIKui (TheKeyLaboratoryofDomesticAnimalGeneticResourcesandGermplasmInnovationofCAAS,InstituteofAnimalScience, ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Beijing100193) Abstract:【Objective】TheobjectiveistoilluminatethemolecularfeaturesandtheexpressionprofileoftheporcineTAF7 (TBP-associatedfactor;TBPisaTATA-bindingprotein)gene.Asonecomponentofthetranscriptionalpre-initiationcomplex,the proteinTAF7playsanimportantroleduringregulationofthegeneexpression.【Method】TheporcineTAF7genefromthe Wuzhishanpigsamplewasclonedandsequenced,andthenitsmolecularfeatureswereanalyzed.MappingoftheporcineTAF7gene toporcinechromosomewasmadewiththeIMpRHpanel.ThemRNAdistributionprofileoftheporcineTAF7geneinsixteenadult Wuzhishanpigtissues(heart,dorsalmuscles,lymphnodes,spleen,liver,kidney,lung,uterus,testicle,stomach,smallandlarge intestine,ovaries,thymusgland,brainandfat)wereexaminedbysemi-quantitativeRT-PCR.【Result】Asequencewithalengthof 1701bpwascloned,it