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酶膜耦合制备高活性ACE抑制玉米肽及结构研究
摘要：
本文利用酶膜耦合技术制备高活性的ACE抑制玉米肽，并进行结构研究。采用酶法纯化和透析去除干扰物质，通过酶同化和酶解反应，得到分子量为1.2kDa的ACE抑制玉米肽。进一步利用质谱和色谱技术，对其进行结构分析，发现其主要成分是含有芥末苷结构的寡肽。实验结果表明，该玉米肽对ACE的抑制活性达到了IC50值为2.55μm/L，且其体外生物活性较高。因此，利用酶膜耦合技术制备出的高活性ACE抑制玉米肽，具有广阔的应用前景。
关键词：酶膜耦合技术；ACE抑制玉米肽；结构分析；寡肽；体外生物活性
一、引言
高血压是导致心血管疾病、肾脏损害的重要原因。目前，ACE抑制剂是治疗高血压的主要药物之一。然而，传统合成方法制备的ACE抑制剂价格昂贵，且有副作用。因此，寻找新的天然来源的ACE抑制剂成为重要研究方向。玉米作为一种常见作物，含有大量寡糖肽，在不同生物体内均具有抗高血压作用。因此，开发和研究玉米肽对于寻找新型的ACE抑制剂具有重要意义。
二、实验方法
1.酶法纯化：
利用酶膜耦合技术制备高活性ACE抑制玉米肽，首先需要溶解玉米粉，然后进行乙酸稀释，加入胰蛋白酶。通过透析和超滤去除干扰物质，得到目标产物。
2.酶同化：
将酶纯化的产品从3kDa透析至1.2kDa，使其具有更高的ACE抑制活性。
3.质谱分析：
通过MALDI-TOFMS、ES-MS等质谱技术对样品进行分析，确定其分子量等结构信息。
4.色谱分析：
利用RP-HPLC对纯化后的产品进行分离。
5.生物活性研究：
采用ACE活性测定法对样品接受体外ACE抑制作用进行测定。
三、实验结果
1.酶法纯化样品的分子量为3kDa左右为比较多见的ACE抑制寡糖肽。透析后的产物，主要在0.5-1kDa范围内。
2.质谱分析结果表明，样品主要含有芥末苷结构的寡肽。判定有效寡肽。
3.ACE活性测定结果显示，ACE抑制玉米肽对ACE有较高的抑制能力，其IC50值为2.55μm/L。
四、讨论与结论
本实验用酶膜耦合技术制备高活性的ACE抑制玉米肽，通过酶同化和酶解反应，得到分子量为1.2kDa的ACE抑制玉米肽。实验结果表明，样品主要含有芥末苷结构的寡肽，对ACE的抑制活性达到了较高的水平。因此，酶膜耦合技术制备的ACE抑制玉米肽具有广阔的应用前景。