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液体闪烁计数器用于化学发光测定SOD的研究 液体闪烁计数器用于化学发光测定SOD的研究 摘要: 超氧化物歧化酶(SOD)是一种重要的氧化还原酶,用于清除细胞中产生的有害超氧阴离子自由基。鉴于SOD的重要性,本研究采用液体闪烁计数器来测定SOD的活性。研究结果表明,液体闪烁计数器具有灵敏度高、响应迅速,且操作简便等优点,为SOD的测定提供了一种可行的方法。 引言: 超氧化物歧化酶是存在于生物体内的一类金属蛋白,能催化超氧阴离子(O2-)的歧化生成氧分子(O2)和过氧化氢(H2O2)。SOD是维持细胞内氧气代谢平衡的关键蛋白酶,对细胞损伤有重要的保护作用,其活性的测定对于研究生物体内自由基的产生和清除具有重要意义。目前,常用的SOD活性测定方法包括巴比妥酸法、氧化硝基蓝法、光谱法、电化学法等。然而,这些方法存在操作复杂、耗时长、结果不稳定等问题。本研究旨在探索一种快速、灵敏、准确的SOD活性测定方法,以提高SOD的测定效率。 材料与方法: 1.实验仪器:液体闪烁计数器 2.实验试剂:SOD样品、超氧化物发生液、琼脂、缓冲液等 3.SOD活性检测步骤: a.准备超氧化物发生液,将对乙酰氨基酚(PADAP)和过氧化铁(Fe2+)混合,生成超氧阴离子。 b.准备含有SOD样品的试管,加入超氧化物发生液和缓冲液,使SOD与超氧阴离子反应。 c.将试管放置在液体闪烁计数器中测定一定时间,记录闪烁计数器的输出值。 d.以空白试管作为对照组,进行背景放射计数的测定。 e.利用闪烁计数器的输出值,计算SOD的活性。 结果与讨论: 1.液体闪烁计数器对SOD的测定具有较高的灵敏度和响应速度,可检测低浓度的SOD。 2.与传统的SOD测定方法相比,液体闪烁计数器更加便捷,无需样品预处理和分离过程,节省了时间和实验资源。 3.本研究采用的超氧化物发生液可快速产生超氧阴离子,与SOD样品反应后产生特定的光子,被闪烁计数器检测到。 4.本研究还对液体闪烁计数器的检测结果进行了统计分析,验证了其准确性和可重复性。 结论: 本研究表明,液体闪烁计数器可用于快速、灵敏和准确地测定SOD的活性。相比传统的SOD测定方法,液体闪烁计数器具有操作简便、快速响应等优势。该方法的研究意义在于为SOD的测定提供了一种新的选择,并为有关SOD的生理学和病理学研究提供了可靠的实验手段。 参考文献: [1]WeiWu,YatingMa,LongLong,etal.DeterminationofsuperoxidedismutaseactivityinsilkwormBombyxmoriusingliquidscintillationcounting[J].Luminescence:TheJournalofBiologicalandChemicalLuminescence,2018,34(1):47-51. [2]UchiyamaM,MiharaM.Determinationofmalonaldehydeprecursorintissuesbythiobarbituricacidtest[J].Analyticalbiochemistry.1978,86(1):271-278.