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烟草中水溶性糖的超高效液相色谱分析及聚类分析研究 烟草作为一种重要的经济作物,具有较高的经济价值和社会价值。为了保证烟草质量,需要对其中的成分进行精细分析。其中水溶性糖在烟草中具有重要的生理和化学作用,因此其分析对于烟草的生产和品质控制具有很大的意义。本文利用超高效液相色谱技术和聚类分析方法对烟草中水溶性糖进行了分析研究。 一、实验方法 1.标准物质和药品 亚油酸、葡萄糖、果糖、蔗糖、苏糖、麦芽糖标准物质均为Sigma公司供应的分析纯,甲醇、乙腈、水纯为色谱纯。 2.仪器设备 WatersAcquityUPLC超高效液相色谱仪、更换式UPLC有机硅胶柱(C18,1.7μm,2.1mm×100mm)、UPLC-C18固相萃取柱(2.1mm×10mm,1.7μm)。 3.色谱条件 A(0.1%氨磺酸水溶液)-B(乙腈)为流动相,色谱梯度程序如下:0-1min,100%A;1-16min,0-60%B;16-18min,60-100%B;18-20min,100%B;20-20.1min,100-0%B;20.1-25min,0%B。流速为0.4mL/min,进样量为1μL。柱温为30℃,检测波长为210nm。 4.样品的制备 将2g烟草样品放在50mL离心管中,加入20mL蒸馏水,超声处理30min,使样品彻底分散。加入10mL甲醇,离心10min,将上清取出,再加入等体积的甲醇,再次振荡、超声,离心。上清液经UPLC-C18固相萃取脱盐、浓缩后,定容1mL甲醇,进行超高效液相色谱分析。 二、实验结果与分析 1.得到的烟草水溶性糖色谱图如图1所示,可以看出烟草中的水溶性糖主要是葡萄糖、果糖和蔗糖等多种单糖和多糖。 [插入图1] 2.进一步利用聚类分析对不同烟草样品的水溶性糖成分进行分析,结果如图2所示。 [插入图2] 可以看出不同的烟草样品水溶性糖成分存在明显的差异。其中,样品1、2、3之间的差异较小,而样品4与其它样品差异较大,主要是因为样品4中含有较高的麦芽糖和苏糖等,而其它样品中则以葡萄糖和果糖为主。这说明不同的烟草样品中水溶性糖的成分差异较大,需要进行差异化处理及分析。 三、结论 通过本文的实验研究可以看出,利用超高效液相色谱技术和聚类分析方法可以对烟草中水溶性糖进行较为精准的分析和鉴定。不同的烟草样品中水溶性糖的成分差异较大,需要进行针对性的分析和处理,为烟草的生产和品质控制提供了科学的参考和依据。