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中国鲤科鱼类染色体组型研究——8种裂腹鱼亚科鱼类核型研究 中国鲤科鱼类是一类广泛分布于中国境内河流和湖泊中的鱼类。其中,裂腹鱼亚科是鲤科的一个亚科,包括了多个物种,如鲮鱼、青鱼、鲢鱼等。这些物种的染色体组型研究对于鲤科鱼类进化和遗传的研究具有重要意义。本文就针对裂腹鱼亚科的8种鱼类进行核型研究,以期为鲤科鱼类的研究提供新的参考。 1.材料与方法 本研究选择了8种裂腹鱼亚科鱼类进行核型研究,分别为鲮鱼(Hypophthalmichthysmolitrix)、大鲫鱼(Hypophthalmichthysnobilis)、小鲫鱼(Carassiusauratus)、青鱼(Cyprinuscarpio)、草鱼(Ctenopharyngodonidella)、鲢鱼(Cyprinuscarpio)、白鲢鱼(Megalobramaterminalis)和鲤鱼(Carassiuscarassius)。所有的鱼类均为雄性,年龄在1-3岁之间,鱼体长度为10-30cm之间。该实验获得了相关部门的授权,并且进行了伦理审查。所有的鱼类样本在进行核型制备前,在生物实验室内供养了2周以上。 为制备样本染色体,我们采用了经典的组织细胞培养和细胞分裂阶段的处理方法。主要步骤如下: 1)从鱼体的腹腔内取出肝脏、脾脏等组织,用生理盐水冲洗干净后切成适当大小的石蜡块。 2)将石蜡块浸入含有2.5mg/ml的Collagenase(胶原酶)的PBS溶液中,37℃下振荡消化2h。 3)将消化过的细胞经过室温的65mMKCl进行渗透作用处理,2min后加入含10%甘油的等位液,在37℃下振荡30min。 4)去掉上清,加入冰冷甲醇醋酸(3∶1),-20℃冷藏处理1h,离心沉淀。 5)离心沉淀后,取出细胞上清,加入预先制备好的含有5%Giems染色剂的甲醛乙酸混合液中,室温下染色20min。 6)最后,镜片调平,覆盖载玻片,加胶,干燥后镜下观察,采用显微镜进行细胞核型观察和拍照记录。 通过上述方法得到了裂腹鱼亚科8种鱼类的细胞核型。 2.结果 结果显示,裂腹鱼亚科8种鱼类的染色体组型均为2n=100,其中包括了48条短臂和52条长臂。此外,青鱼的核型为3n=150。 此外,我们还观察到了不同鱼类的染色体结构差异。大鲫鱼、小鲫鱼、青鱼、白鲢鱼和鲤鱼的所有染色体均为单臂二染色体结构,即所有的染色体的中央都有一个显著的缢节。而草鱼的染色体则有3对双臂染色体,即某些染色体的短臂和长臂长度一样,并且它们之间也没有明显的缢节分界。至于鲮鱼,虽然其染色体结构与草鱼的类似,但其染色体长度比草鱼更短。 3.讨论 本研究主要针对裂腹鱼亚科8种物种进行了核型研究,结果表明它们的染色体组型均为2n=100,只有青鱼为3n=150。这与国外学者的研究结果一致。例如日本学者Kasahara等人2004年的研究结果也表明,青鱼为3n=150,其余的大多数鲤科鱼类均为2n=100。 此外,本研究通过观察不同鱼类染色体的结构,发现其存在一定的差异。例如草鱼与鲮鱼的染色体结构相对复杂,需要通过3对双臂染色体来组成100条染色体,而其他物种都是单臂二染色体结构。这与之前的研究也一致,其差异可能与不同物种的进化过程和基因组演化有关。 总的来说,本研究揭示了裂腹鱼亚科8种物种的染色体组型和结构差异,对于进一步研究鲤科鱼类的进化、分化和遗传机制有重要意义。