溶液配制方法p.docx

实验室常用试剂、缓冲液的配制方法
1MTris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度：1MTris-HCl，配制量：1L配制方法：1.称量121.1gTris置于1L烧杯中。
2.加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3.按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
将121g的Tris碱溶解于约0.9L水中，再根据所要求的pH（25℃下）加一定量的浓盐酸（11.6N）
浓盐酸的体积（ml）pH8.6142128.53846566671.3769.08.88.68.48.28.07.87.67.47.24.将溶液定容至1L。5.高温高压灭菌后，室温保存。注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
Tris–HCl冲液（0.05M，25℃）
50毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1N盐酸混匀后，加水稀释至100毫升。
pHX(毫升)pHX(毫升)7.10
7.20
7.30
7.40
7.50
7.60
7.70
7.80
7.90
8.0045.7
44.7
43.4
42.0
40.3
38.5
36.6
34.5
32.029.28.10
8.20
8.30
8.40
8.50
8.60
8.70
8.80
8.9026.2
22.919.9
17.2
14.7
12.4
10.3
8.5
7.0三羟甲基氨基甲烷（Tris）HOCH2-CH2OH-CHOCH2-NH2分子量=121.14;0.1M溶液为12.114克/升。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。
0.5MEDTA(pH8.0)组份浓度：0.5MEDTA，配制量：1L，配制方法：1.称取186.1gNa2EDTA·2H2O，置于1L烧杯中，加入约800ml的去离子水，充分搅拌。2.用NaOH调节pH值至8.0（约20gNaOH)。注意：pH值至8.0时，EDTA才能完全溶解。3.加去离子水将溶液定容至1L，适量分成小份后，高温高压灭菌，室温保存。
10×TEBuffer(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度：100mMTris-HCl,10mMEDTA，配制量：1L3M醋酸钠(pH5.2)组份浓度：3M醋酸钠，配制量：100ml配制方法：1.称量40.8gNaAc·3H2O置于100-200ml烧杯中，加入40ml的去离子水搅拌溶解2.加入冰醋酸调节pH值至5.23.加去离子水将溶液定容至100ml4高温高压灭菌后，室温保存。
PBSBuffer(1×)组份浓度：137mMNaCl,2.7mMKCl,10mMNa2HPO4,2mMKH2PO4，配制：1L配制方法：称量试剂:8gNaCl,0.2gKCl,1.44gNa2HPO4,0.24gKH2PO4，置于1L烧杯中。加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。滴加浓盐酸将pH值调节至7.4，然后加入去离子水将溶液定容至1L。高温高压灭菌后，室温保存。
PB缓冲液(pH8.0)：1LNaH2PO40.16537g,Na2HPO46.7817g.注意：上述PBSBuffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1mMCaCl2和0.5mMMgCl2。
10M醋酸铵组份浓度：10M醋酸铵，配制量：100ml配制方法：1.称量77.1g醋酸铵置于100～200ml烧杯中，加入约30ml的去离子水搅拌溶解。2.加去离子水将溶液定容至100ml。3.使用0.22mm滤膜过滤除菌。4.密封瓶口于室温保存。注意：醋酸铵受热易分解，所以不能高温高压灭菌。
常用缓冲液的配制方法
1.甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05M）
Xml0.2M甘氨酸+Yml0.2M盐酸再加水稀释至200ml.
pHX/mlY/mlpHX/mlY/ml
2.25044.03.05011.4
2.45032.43.2508.2
2.65024.23.4506.4
2.85016.83.6505.0
甘氨酸分子量＝75.070.2M甘氨酸溶液含15.01g/L.
2.邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05M）
Xml0.2M邻苯二甲酸氢钾+Yml0.2M盐酸再加水稀释至200ml.
pHXYpHXY
2.254.6703.251.470
2.453.9603.450.990
2.653.2953.650.597
2.852.6423.850.263
3.052.032
邻苯二甲酸氢钾分子量＝2.4.230.2M邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85g/L.
3.磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液
pH0.2MNa2HPO4/ml0.1M柠檬酸/mlpH0.2MNa2HPO4/ml0.1M柠檬酸/ml
2.20.4019.65.210.729.28