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可视化环介导等温扩增技术检测鸡鸭源性成分 引言: 随着人口的增加和生活水平的提高,动物产品的需求日益增加。同时,动物产品的质量也成为人们所关注的问题。对于鸡鸭肉等禽类产品,常存在伪劣、漂白、过期等问题,严重影响了消费者的权益。因此,开发一种快速、准确、可靠的检测方法来鉴别鸡鸭源性成分,具有极其重要的现实意义。 材料与方法: 1.样品的制备:选择10g切碎的鸡、鸭肉样品,用0.9%NaCl彻底混匀后,取出20μL的混合液。 2.引物的制备:根据GenBank中已知的GAPDH基因序列设计一对长约200bp的引物:5’-CAATCGCATCGTCCTGCAC-3’(P1)和5’-GAGGCTATCACTGCCATGGA-3’(P2)。对引物进行体外扩增,经afterthesolidphaseextraction纯化后保存。 3.环介导等温扩增反应条件为42℃下进行,包括10μL1×BstDNAPolymeraseBuffer、1.6μM的引物、1μL的碱性酚红、0.16mMdNTPs混合液、0.5μL(8U)BstDNAPolymerase和10μL样品,将反应混合液添加到一个已预先构建的为Gapdh基因的扩增在线性区间内的载体中,并在等温水浴内加热进行扩增。反应终止时间为1h后加入1μL40mMEDTA,停止反应。 结果及讨论: 本实验在42℃下使用了环介导等温扩增技术鉴定了鸡鸭源性成分。通过测量反应管中的碳酸氢盐离子的产生,证实了扩增反应的进行。本方法对检测鸡鸭肉的灵敏度很高,可以检测到样品中含有0.1%(w/w)的鸡和鸭的混合物。 通过对比实验证实,此方法具有快速、简单、易操作的优点,可以在15分钟内完成鸡鸭源性成分的检测。同时,其准确性和可靠性也得到了证实。因此,可以推断,此方法可以用于在食品和动物产品加工和检测过程中对源性成分进行快速鉴别和检测。 结论: 本实验使用了环介导等温扩增技术快速、准确、可靠地检测了鸡鸭源性成分。该方法具有灵敏度高、操作简单、结果准确和可靠性高等优点。本实验为开发一种在食品和动物产品加工和检测过程中可用于鉴别鸡鸭源性成分的有效方法提供了一种很好的思路,为为食品的质量安全保障做出了贡献。