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几种全血铅标准测定方法的比较 娄淑艳1,罗晓芳1,李玉山2,吉桂叶2,催明煊1,杨士杰3 [摘要]目的:比较血中铅标准测定方法的各项指标,以便选择应用。方法:首先比较采样方法、样 品预处理、分析步骤,然后根据不同类型的原子吸收光谱仪和微分电位溶出仪实测结果计算出方法的各项 指标,并进行比较,最后比较各种方法的成本。结果:几种标准方法均可满足检测血铅的要求。结论:进 口原子吸收光谱仪灵敏度较高,但价格昂贵。综合考虑,微分电位溶出法不失为血铅检测的好方法。 [关键词]全血:铅:原子吸收光谱法:微分电位溶出法。 全血铅是诊断职业性慢性铅中毒的指标之一,也是预防、诊断儿童铅中毒的指标。多年 来职业病防治机构已使用石墨炉原子吸收光谱法和微分电位溶出法检测全血铅,并将其报批 为国家标准方法。近年来鉴于儿童铅中毒的预防,各级疾病预防控制机构、妇幼保健机构、 儿童医院、综合医院乃至中医院也相继开展了全血铅的检测,目前已相当普及,不仅省、市 的上述医疗机构,甚至县级医疗机构和一些个体诊所也开展了此项目。开展全血铅的检测, 就必须先选定方法、添置设备,为了帮助欲开展此项目的单位选好方法。本文试图对几种全 血铅测定标准方法的采样、样品处理、方法的线性、误差大小、灵敏度高低以及检出限和成 本进行比较,以供应用选择。 目前检测全血铅的方法仍为原子吸收光谱法和微分电位溶出法。其名称和标准编号如下 [1]: 1、血中铅的Thiton-X100稀释—石墨炉原子吸收光谱法,标准编号为WS/T20-1996(以 下简称为AAS-20-1996)。 2、血中铅的酸脱蛋白——石墨炉原子吸收光谱法,标准编号为WS/T174-1999(以下简 称AAS-174-1999)。 3、血中铅的微分电位溶出法,标准编号为WS/T21-1996(以下简称为DPSA-21-1996)。 在上述标准中对方法的原理,采样方法、样品预处理、分析步骤,各项指标均有详细说 明,我们对上述各项,以及我们的实际应用情况,一并加以比较,以便选取方便、准确、误 差小和成本低的分析方法。 一、采样方法 在上述三项标准方法中,AAS-20-1996和DPSA-21-1996的采样方法相同,可常规采集耳 垂血或手指血40uL,也可采集空腹静脉血於肝素钠抗凝具塞聚乙烯试管中4。C保存。 [作者单位]1.河南省职业病防治研究所,河 南郑州,450052;2.郑州大学第三附属医院, 郑州.3.河南省中医学院第一附属医院,郑州. [作者简介]娄淑艳(1957)女,主管医师,主 要从事职业卫生, 1 而AAS-174-1999需样量大,只能采集静脉血,故从采血方便考虑应选用AAS-20-1996和 DPSA-21-1996。 二、样品预处理 AAS-20-1996和DPSA-21-1996二种方法不需预处理,即把40uL耳垂血或手指血分别 加至0.36mL和3.0mL试剂中,放置数分钟即可上机测量。也可把低温存放的静脉血恢复至 室温后,取40uL按上述方法处理。 AAS-174-1999方法需对样品作简单预处理,即采集静脉血(或低温存放恢复至室温的 静脉血),取0.15mL於具塞离心管中,加入5%硝酸0.6mL,盖好塞子,振摇,后在旋涡混 合器上振荡、静止,离心取上清液10uL上机测量。 三、方法线性、相对标准偏差、灵敏度、检出限和检出浓度 线性用标准(工作)曲线的相关系数表示,相对标准偏差RSD(%)用σn-1/x表示, 灵敏度用曲线回归方程斜率或其倒数表示,检出浓度用空白值标准差的三倍相应的浓度表 示,检出限用检出浓度乘以进样体积表示。血液检出浓度检出浓度乘以样品稀释倍数。 通过一、二项比较,应选用AAS-20-1996和DPSA-21-1996,故在此该二种方法的上述 指标。用美国PE-AA-800型、国产MG-2型石墨炉原子吸收光谱仪、BH2100钨舟原子吸收光 谱仪和山东济南齐力QL-800型微量元素分析仪,分别采用石墨炉原子吸收光谱法和微分电 位溶出法测得标准(工作)曲线的数据(见表1-表4),并由此统计计算出上述指标,见表 5。 表1PE-AA-800测得工作曲线及相关数据 工作曲线试剂空白A0质控样品ug/L 标系列浓度c(ug/L)0510202596±20230±15 20uL中铅含量m(ng)00.10.20.40.5 吸光度(A)00.01030.02030.04450.05330.0171±0.00124 注:表中数据系仪器在最佳状态下进样20uL,样品用试剂稀释10倍测得结果;试剂空白为连续11次测 得吸光度(A0);质控样品11次测得结果82.5±7.4244.1±9.6 表2MG-2测得工作曲线及相关数 工作曲线试剂空白(A0) 标系列浓度c(ug/L)