重组质粒的转化.ppt

06十一月2024外源DNA与载体分子的连接即为DNA重组技术，重组的DNA分子式在DNA连接酶的作用下，有Mg2+、ATP存在的连接缓冲系统中，将分别经限制性内切酶酶切的载体分子和外源DNA分子连接起来。将重组质粒导入感受态细胞中，将转化后的细胞在选择性培养基中培养，可以通过各种方法筛选出重组子，并可通过酶切电泳进行重组子的鉴定。感受态感受态细胞制备方法及原理CaCl2法制备感受态细胞影响因素转化转化过程所用的受体细胞一般是限制－修饰系统缺陷的变异株，即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变株。方法及原理操作步骤提高转化效率的方法重组子的筛选蓝白斑筛选筛选原理通过看培养皿上的菌斑的颜色就能直接知道是否有DNA插入。抗生素抗性筛选转基因技术转基因技术就是将人工分离和修饰过的基因导入到生物体基因组中，由于导入基因的表达，引起生物体的性状的可遗传的修饰。人们常说的“遗传工程”、“基因工程”、“遗传转化”均为转基因的同义词。
基因工程和选择性繁殖技术有什么不同“选择性繁殖”技术植物转基因方法花粉管通道农杆菌介导的植物转基因技术感染转化转基因和克隆技术克隆羊“多莉”的产生过程32转基因技术和传统育种技术有什么区别转基因食品基因产品的开发现状重组子的鉴定及基因表达产物的分析利用有插入片段的重组载体的分子量比野生型载体分子量大。根据重组DNA分子大小鉴定重组子
原理：有外源DNA片段插入载体后的重组DNA与载体DNA之间的大小差异。
基本方法：提取转化子的DNA，经琼脂糖凝胶电泳分离，电泳迁移慢的带是重组DNA的带。
此法是对重组子进行分析鉴定的最基本、最简单的方法，只适用于重组子的初步鉴定。聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）：点样凝胶中的蛋白质染色：直接染色电泳结果2.1探针（Probe)的概念:
一段带有检测标记的与目的基因或目的DNA特异互补的已知核苷酸序列。此技术由Southern1975年首先设计。被检测对象为DNA。带有DNA片段的凝胶。