半抗原免疫分析(全面).ppt

半抗原免疫分析ABC内容抗原
antigen,Ag(一)抗原的概念
抗原(Antigen,Ag)是一类能刺激机体免疫系统产生特异性免疫应答,并能与相应的免疫应答产物在体内或体外发生特异性结合的物质.
(二)完全抗原与半抗原

1.完全抗原（complexantigen):
既具免疫原性又有免疫反应性的物质.
如:大多数蛋白质.

2.半抗原(hapten):
仅有免疫反应性而无免疫原性的物质.如:大多数多糖、类脂、某些药物.
半抗原+载体(蛋白质)完全抗原6共同抗原与交叉反应共同抗原与交叉反应

1.共同抗原(Commonantigens)：
存在于两种不同的抗原之间的相同或相似的抗原决定簇，称为共同抗原。
2.交叉反应(Cross-reaction)：
由于存在共同抗原造成抗体对具有相同或相似决定簇的不同抗原发生反应，此称为交叉反应。
检测意义：假阳性（避免）
多残留检测（利用）农药、兽药、生物毒素、重金属、维生素、防腐剂、植物激素等半抗原

在食品安全、植物学、环境检测等领域，主要是半抗原类物质。抗体antibody,Ab一、基本概念二、免疫球蛋白的分子结构2.分类、分型：
（1）根据重链氨基酸组成、序列及结构的差异，将Ig分为五类：

IgM(µ)、IgG(γ)、IgA(α)、IgD(δ)、IgE(ε)
亚类：IgG：IgG1,IgG2,IgG3,IgG4
IgA：IgA1,IgA2
IgM:IgM1,IgM2

（2）分两型：
根据轻链氨基酸组成、序列及结构的差异，可将轻
链分为两型：κ和λ型
每一Ig单体分子两条重链必须同类，两条轻链必须
同型。
3.基因工程抗体(GeAb):
第三代抗体
由基因重组技术制备的抗体,称为基因工程抗体。
嵌合抗体(chimericAb)
人源抗体（humanizedAb)
双特异性抗体（bispecificAb)
Fab/ScFV（singlechain
FVfragment)
单域抗体（singlechainAb)抗体的结构与功能的关系，
所展现出的生物学功能是其结构的完美表演者。免疫分析技术常用的免疫标记物质一、标记免疫方法分类2．按是否加入分离剂分（一）ELISA技术的原理夹心法
Sandwich竞争法（二）ELISA所用试剂材料1、固定相2、最常用的标记酶3、最常用的底物4、缓冲液酶标仪酶标仪（三）免疫分析方法建立——苏丹红为例Step1:HaptenandconjugateStep2:characterizationofconjugateStep3:chessboardtiatrionandcalibrationcurveStep4:optimization—nonessential例1、标记抗原浓度对检测的影响例，pH影响Step5:sampleanalysisStep6:validation一个难点：基质效应基质效应例1：环境水样的基质效应（2）基质干扰的消除