【实验】DNA片段的扩增和琼脂糖凝胶电泳检测.docx

《保护“东方宝石”家族——PCR技术的应用》学案
资料分析
资料1：朱鹮为雄雌同形同色的鸟类，成鸟全身羽色以白色为基调，但上下体的羽干以及飞羽略沾淡淡的粉红色。
资料2：鸟类的性染色体上存在着一条假基因序列EE0.6，该基因属于基因家族在进化过程中形成的无功能的残留物，W染色体上的EE0.6基因序列存在着特异性。
资料3：鸟类的CHD基因（编码染色体螺旋DNA结合蛋白）在Z、W染色体上存在着序列长度的差异，Z染色体上该基因序列较长，而W染色体上该基因序列较短。
资料4：朱鹮鸟幼雏在自然环境中成活率低下，甚至出现胚胎致死的现象。研究者发现朱鹮鸟易的近亲繁殖现象是导致朱鹮繁殖成功率低下的重要原因。
资料5：微卫星DNA是一段2-6个核苷酸为单元的重复序列，如···GTGTGTGT….···，可用(GT)n代表，n代表重复出现的次数。每个个体同源染色体上的两个重复次数越接近，则亲缘关系就更近。因此，可采用以下T17、T13、D19、D01、D16、D17、D327个微卫星位点判断鸟类的亲缘关系。
表1：同源染色体上微卫星的重复次数
个体位点T17T13D19D01D16D17D32个体1，雄220/240205/234197/22180/84100/110124/132166/174个体2，雌220/240205/217197/22180/90100/110124/132166/174个体3，雄148/148190/217193/22175/8490/100124/132148/156个体4，雌244/244217/234197/22175/90100/104132/148144/156个体5，雌220/244205/217197/22175/90100/110132/148160/166个体6，雄244/224205/217197/22175/90100/110132/148148/160个体7，雄244/244217/234197/22175/90104/116132/148144/160注：如T17位点“220/240”，代表T17位点在一对同源染色体上重复了“220次”和“240次”。
表2：下表是7只朱鹮鸟的雌雄配对情况，请你在空格处填写出该对朱鹮鸟不同的微卫星位点个数。
个体1，雄个体2，雌个体3，雄个体4，雌个体5，雌个体6，雄个体7，雄个体1，雄——————————个体2，雌——————个体3，雄————————个体4，雌——————个体5，雌——————个体6，雄————————个体7，雄————————
二、实验设计
（一）实验目的：鉴定仅存的7只朱鹮鸟性别
（二）选择生物样本：请你从血液、羽毛、脚垫、肌肉这4个生物样本中选择出适合做本研究的一项。
（三）实验仪器及材料：
离心管、移液枪、枪头、PCR扩增仪及反应体系、电泳仪及反应体系等。
（四）设计实验步骤：
1.
2.
3.
4.
5.
（五）记录实验结果：

图1电泳条带结果
表3：实验结果记录
个体编号1234567性别
（六）分析结果，得出结论：