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可溶性糖含量测定(蒽酮法) 材料 仪器:分光光度计、天平、水浴锅、 大试管、三角瓶、容量瓶100ml、量筒25ml、移液管5ml一支、1ml一支、小漏斗 药品:标准葡萄糖溶液、准确城区无水葡萄糖200mg,放入200ml容量瓶中,加入蒸馏水定容,使用时稀释10倍(100ug/ml) 蒽酮试剂:称取0.1g蒽酮溶于100ml稀硫酸中(76ml浓硫酸稀释成100ml),贮于棕色瓶内,冰箱保存,可用数日。 方法 1、葡萄糖标曲 项目管号空白12345标准葡萄糖液/ml00.20.40.60.81蒸馏水10.80.60.40.20蒽酮试剂555555将各管摇匀,在沸水浴中煮沸10分钟,取出冷却,在620nm波长处比色,以空白调零点,记录光密度值,绘制标准曲线。 样品中可溶性糖的提取称取减碎新鲜样品0.5~1g,放入三角瓶50ml中,再加入25ml蒸馏水,放入沸水浴中煮沸20min,取出冷却,过滤入100ml容量瓶中,用热水冲洗残渣数次,定容至刻度。 测定 项目管号空白12345样品提取液00.50.50.50.50.5蒸馏水10.50.50.50.50.5蒽酮试剂555555在分光光度计上比色,测出光密度值,在标曲上查出相应含糖量(ug) 结果计算 可溶性糖含量%=【(糖含量(ug)×稀释倍数)/(样品质量×106)】×100 有机酸测定 仪器:天平、刀、研钵、漏斗、玻璃棒、水浴锅、滴定管、滤纸、移液管10ml一支,容量瓶50ml、三角瓶50ml,量筒25ml1个 药品:0.1mol/L氢氧化钠,1%酚酞,石英砂 步骤 城区5g番茄果肉,放入研钵中,加少许石英砂研磨成匀浆,用蒸馏水洗入50ml三角瓶中,加水约30ml,放在80°水浴锅中浸提30分钟,每隔5分钟搅拌一次。取出冷却,过滤入50ml容量瓶中,并用蒸馏水洗残渣数次,定容至刻度,充分摇匀作测定用。 两区10ml样液放入50ml三角瓶中,加三滴酚酞指示剂,用0.1mol/L 氢氧化钠滴定至微红色,摇1min不褪色为终点,取3次平均值 计算结果 有机酸含量=(A×0.1×K×C)÷(W×D)×100 A滴定时消耗的氢氧化钠量,0.1=4×10-3g/ml K=0.67 C稀释总量 W样品质量 D测定时所取样液量ml 抗坏血酸测定(2,6-二氯酚靛酚法) 仪器研钵、漏斗、玻璃棒、定量滤纸、滴定管、移液管、容量瓶、三角瓶 药品2%草酸溶液:溶解20g草酸结晶与200ml水中,然后稀释至1000ml。 200ml0.01%2,6-二氯靛酚钠溶液:称区2,6-二氯靛酚钠60mg,放入容量瓶中,加热的蒸馏水100-150ml,滴加0.01mol/L的氢氧化钠4-5滴,强烈震动10分钟,冷却后加水至刻度,摇匀后用精密滤纸过滤于棕色瓶内,贮于冰箱中备用。有效期一周。 抗坏血酸标准溶液:准确称取20mg抗坏血酸,溶于2%草酸溶液中,定容至200ml,混匀,吸取比液10ml,再以2%草酸溶液稀释定容至200毫升。 方法 样品处理和提取 城区适量5g样品置研钵中,加4毫升2%草酸,研磨成匀浆,用玻璃棒将样品提取液转移到50毫升容量瓶中,残渣用草酸洗2-3次和提取液一并转入容量瓶中,最后用2%草酸定容至刻度,摇匀过滤,滤液备用。 空白的测定 吸取10ml2%草酸,放入50毫升三角瓶中,用2,6-二氯靛酚钠溶液滴定至溶液呈粉红色于15秒内部褪色为止,记录所用滴定液体积(重复三次,取平均值)。 2,6-二氯靛酚钠溶液滴标定 吸取标准抗坏血酸溶液10ml,放入50ml三角瓶中,立即用所要标定的2,6-二氯靛酚钠溶液滴定至溶液呈粉红色于15秒内不褪色,记录用滴定液体积(重复三次,取平均值)。按下式计算K值,K=×× K为1ml2,6-二氯靛酚钠所能氧化抗坏血酸的质量,G为称取抗坏血酸的质量V滴定10毫升抗坏血酸溶液所用去2,6-二氯靛酚钠的体积与丁丁空白所用体积的差值。 样品测定 吸取滤液10毫升,放入50毫升三角瓶中,立即用要标定的2,6-二氯靛酚钠溶液滴定至溶液呈粉红色于15秒内不褪色,记录用滴定液体积(重复三次,取平均值)。 结果与分析 X=×100 x为100g样品中所含维生素含量(mg/100g)w为称取样品的质量(g);v样为滴定样品所用的2,6-二氯靛酚钠溶液的体积(ml),v滤为样品测定测定时所用滤液体积(ml);V为样品提取液稀释之总体积,K为上k值。 可溶性总糖的测定 仪器:分光光度计;20ml刻度试管;刻度吸管(5ml,1ml);记号笔;吸水纸适量 试剂1、蒽酮乙酸乙酯试剂:取分析纯蒽酮1g,溶于50ml乙酸乙酯中,贮于棕色瓶中,在黑暗中可保存数星期,如有结晶析出,可微热溶解。 2浓硫酸(比重1.8