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亮菌产漆酶的液体和固体发酵条件优化 引言 漆酶(Laccase)是一种广泛存在于真菌、细菌和植物中的富含铜离子的氧化酶,它能够催化类酚化合物的氧化反应,并参与多种生物过程。漆酶具有广泛的应用前景,如水处理、生物技术、化妆品和医药等领域。亮菌(Pleurotusostreatus)是食用菌之一,同时也是一种产漆酶的真菌,在工业上具有很大的潜力。因此,本文旨在通过液体及固体发酵的优化探究亮菌产漆酶的生产条件。 方法 液体发酵 实验采用亮菌菌株进行培养,通过液体发酵进行产漆酶的研究。液体发酵培养基的配方为:葡萄糖20g/L、玉米粉10g/L、KH2PO40.3g/L、MgSO4·7H2O0.5g/L、FeSO4·7H2O0.01g/L、ZnSO4·7H2O0.01g/L、CuSO4·5H2O0.005g/L、MnSO4·H2O0.005g/L、Na2MoO40.005g/L、pH5.5.在此基础上分别改变液体发酵过程中的温度、初始pH、培养时间等参数,对亮菌的产漆酶量进行分析。 固体发酵 实验采用亮菌菌株进行培养,通过固体发酵进行产漆酶的研究。固体发酵培养基的配方为:玉米粉50g、喜马拉雅盐10g、石膏2.5g、H2O适量。在此基础上分别在固体发酵过程中添加不同的发酵条件,如不同的培养时间、不同的温度、不同的通气量等,对亮菌的产漆酶量进行分析。 结果及讨论 液体发酵 实验结果表明,亮菌的最适发酵温度为30℃,在该温度下,亮菌可以产生较高的漆酶活性,最高漆酶活性可达到78.5U/mL。而当温度过高(如35℃)时,亮菌的生长速度会变慢,导致产酶量下降。此外,以葡萄糖为碳源时,最适初始pH为6.0,而以玉米粉为碳源时,最适初始pH为5.5。在液态培养基中添加Cu2+和sodiumtartrate,可以显著增加漆酶活性,其中Cu2+的最佳浓度为1mM。当培养时间达到8天时,亮菌的漆酶活性达到最高,为93.2U/mL。 固体发酵 实验结果表明,亮菌的最适发酵温度为28℃,在该温度下,亮菌的漆酶活性达到最高,为23.6U/g。发酵过程中通气量也对漆酶产量有影响。适当的通气量可以提高亮菌的漆酶产量。而培养时间则是影响漆酶产量的重要因素。随着培养时间的延长,亮菌的漆酶活性逐渐升高,最佳的培养时间为10天。 结论 本文通过液体发酵和固体发酵两种不同方式进行亮菌的培养,探究不同的发酵条件对亮菌产生漆酶的影响。实验结果表明,温度、初始pH、培养时间、通气量等因素对亮菌产漆酶的影响较大。根据本次实验结果,可以得出以下结论:在液体发酵中,亮菌最适发酵温度为30℃,最适初始pH为6.0,Cu2+的最佳浓度为1mM,最佳的培养时间为8天;而在固体发酵中,亮菌最适发酵温度为28℃,最佳培养时间为10天。这些结论可以为亮菌的漆酶生产提供有益的指导。