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黄籽菜籽蛋白酶解产物的抗氧化活性研究 摘要 本研究对黄籽菜籽蛋白酶解产物的抗氧化活性进行了研究,使用指标包括DPPH自由基清除能力、还原能力、金属离子螯合能力以及过氧化氢清除能力。研究表明,黄籽菜籽蛋白酶解产物对自由基有明显清除能力,其中以组合酶解产物在DPPH清除活力最高,达到了56.67%;对金属离子的螯合能力也较为突出,其中以单独碱性蛋白酶解产物在铁离子螯合能力最强,达到了85.49%。同时,黄籽菜籽蛋白酶解产物还表现出一定的过氧化氢清除能力和还原能力。因此,本研究的结果验证了黄籽菜籽蛋白酶解产物具有良好的抗氧化活性,可作为一种天然的抗氧化剂应用于食品、医药、美容保健等领域。 关键词:黄籽菜籽蛋白酶解产物;抗氧化活性;DPPH自由基清除能力;金属离子螯合能力;过氧化氢清除能力 Abstract Thisstudyinvestigatedtheantioxidantactivityofyellowmustardandrapeseedproteinhydrolysateproducts,includingDPPHscavengingability,reducingpower,metalionchelatingability,andhydrogenperoxidescavengingability.Theresultsshowedthatthehydrolysateshavesignificantcapabilitiestowardsfreeradicalscavenging,especiallythecombinationhydrolysatewhichhadthemostsignificantDPPHscavengingability,reaching56.67%.Inaddition,thehydrolysateshadoutstandingmetalionchelatingability,especiallythealkalineproteinhydrolysatewhichhadahighestironionchelatingabilityofupto85.49%.Thehydrolysatesalsoexhibitedacertainhydrogenperoxidescavengingabilityandreducingpower.Therefore,theresultsofthisstudyvalidatedthatyellowmustardandrapeseedproteinhydrolysateproductshavegoodantioxidantactivity,andcanbeusedasnaturalantioxidantsinfood,medicine,beautyandotherfields. Keywords:yellowmustardandrapeseedproteinhydrolysateproducts;antioxidantactivity;DPPHscavengingability;metalionchelatingability;hydrogenperoxidescavengingability 1.前言 近年来,抗氧化剂在食品、医药、美容保健等领域中得到了广泛的关注和应用。抗氧化剂可以通过清除自由基和抑制活性氧的产生等途径来起到保健作用,减轻或预防心脑血管疾病、癌症、老年痴呆等疾病的发生。目前市面上大部分的抗氧化剂都是化学合成的,因此不可避免会存在一定的毒性和副作用。相反,天然的抗氧化剂则具有更好的安全性和较小的副作用。因此,研究天然产物中潜在的抗氧化剂具有很大的意义。 2.实验方法 2.1材料和试剂 黄籽菜籽蛋白,DPPH,FeCl2,EDTA,Na2HPO4,Na2CO3,H2SO4,NaOH等试剂均为分析纯。 2.2酶解方法 将黄籽菜籽蛋白分别采用单独酸性酶、碱性酶、中性酶和组合酶酶解,酶解条件为温度为50℃,酶解时间为3h,酶解酶质与底物质量比为1:100。 2.3抗氧化试验 2.3.1DPPH自由基清除能力 取不同浓度的黄籽菜籽蛋白酶解产物与0.1mM/LDPPH乙醇溶液混合,并在黑暗中放置30min后,用紫外分光光度计(UV-2S)测定其吸收值。通过比对与对照组的差异来计算其DPPH自由基清除能力。 2.3.2还原能力 取不同浓度的黄籽菜籽蛋白酶解产物与0.2M/LNa2HPO4-citric缓冲液相混合,加入0.1M/LFeCl2,并在pH3.6的条件下进行反应。在30min后,使用紫外分光光度计测定其吸收值,以比较其还原能力。 2.3.3金属离子螯合能力 取不同浓度的黄籽菜籽蛋白酶解产物,加入含1mM/LFeCl2的磷酸缓冲液,加入PMS,溶液进行反应,反应时间为30