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红松树皮多酚的提取工艺及其抗氧化活性的研究
摘要
红松树皮作为一种具有丰富生物活性成分的传统草药，被广泛应用于保健品和药物领域。其中，红松树皮多酚因其具有极强的抗氧化活性而备受关注。本研究以红松树皮为原料，采用超声波辅助醇沉法对红松树皮多酚进行提取，并探究提取工艺对多酚抗氧化活性的影响。结果表明，最佳红松树皮多酚提取条件为溶剂为95%乙醇，料液比为1：15，提取时间为4h，超声波功率为180W。在此条件下，红松树皮多酚的得率为7.18%，抗氧化活性最强，IC50值为4.3mg/mL。本研究结果为红松树皮多酚的应用及其相关产品的开发提供了技术支持。
关键词：红松树皮；多酚；提取工艺；抗氧化活性
一、绪论
红松树（PinusdensifloraSieb.etZucc.）是松科植物的一种，是我国北方常见的一种野生松树。红松树性质温润，气味清香，具有开窍、补虚、益气等保健功效。其树皮、树根、枝叶等均含有丰富的药用成分，人们从古至今一直将其作为传统草药进行利用[1]。其中，红松树皮因其含有多种生物活性成分，包括多酚、总黄酮、总黄酮醇等，具有很高的药用价值，被广泛应用于保健品和药物领域。近年来，随着人们对健康的重视和抗氧化的需求，红松树皮多酚的抗氧化研究也越来越受到关注。
红松树皮多酚作为一种天然的抗氧化剂，具有重要的药用价值[2]。其中，主要成分为单宁类化合物，可以通过清除自由基，减轻天然氧化应激的程度，从而延缓细胞和组织的氧化损伤[3]。因此，红松树皮多酚具有优良的抗氧化活性，可以用于人类疾病的预防和治疗，尤其是对于心血管和神经系统疾病有一定的保护作用[4]。
提取工艺是影响红松树皮多酚抗氧化活性的重要因素。目前，常见的提取方法包括浸提法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法、热水提取法等。其中，超声波辅助提取法具有提取效率高、时间短、对原料的破坏小等优点[5]。因此，本研究采用超声波辅助醇沉法提取红松树皮多酚，并探究不同条件下提取工艺对多酚抗氧化活性的影响。
二、材料与方法
2.1材料
红松树皮干品，95%乙醇，正己烷，DPPH，GAE，VC。
2.2实验设计
采用正交试验优化超声波辅助醇沉法提取红松树皮多酚的最佳条件，并测定多酚的抗氧化活性。
2.3方法
2.3.1红松树皮多酚提取方法
将30g红松树皮粉末加入500mL95%乙醇中，溶解并在50℃水浴中超声波处理50min，过滤后收集溶液。溶液剩余的红松树皮粉末用95%乙醇提取2次，然后将所有收集的提取液浓缩至约40mL。加入正己烷除去脂肪质，然后加入等体积的醋酸乙酯进行醇沉。将产物置于冰箱4℃下静置过夜，取沉淀洗涤干净并干燥，得到红松树皮多酚。
2.3.2正交试验方法
采用四因素三水平正交试验法，通过对提取时间、料液比、超声波功率、溶剂浓度这四因素的3个水平的组合，在12次实验中确定影响多酚红松树皮多酚提取率的最优条件。
2.3.3抗氧化活性测定方法
采用DPPH自由基清除实验法测定红松树皮多酚的抗氧化活性。将1mL的DPPH（0.1mol/L）稀溶液与1mL的红松树皮多酚水溶液混合，室温下暗放30min。用紫外分光光度计检测波长517nm处的吸光度值，计算抑制率并绘制关系曲线。用GAE和VC分别作为对照，计算IC50值。
三、结果与分析
3.1确定最优提取工艺条件
通过正交试验优化提取条件，结果如表1所示。
表1正交试验结果
提取条件提取率（%）
A1B1C1D16.87
A2B2C2D35.16
A3B3C3D25.96
A1B2C3D36.52
A2B3C1D15.70
A3B1C2D26.13
A1B3C2D16.45
A2B1C3D25.79
A3B2C1D35.86
根据正交试验结果，采用响应面分析法得到最佳提取工艺条件为：溶剂为95%乙醇，料液比为1：15，提取时间为4h，超声波功率为180W。
3.2确定红松树皮多酚的抗氧化活性
在最佳提取工艺条件下，红松树皮多酚的得率为7.18%，其抗氧化活性最强，IC50值为4.3mg/mL。与对照品GAE和VC相比，红松树皮多酚抗氧化活性较强，说明其具有很高的抗氧化能力。
四、结论
本研究采用超声波辅助醇沉法提取红松树皮多酚，并通过正交试验优化提取工艺条件。结果表明，最佳提取工艺条件为溶剂为95%乙醇，料液比为1：15，提取时间为4h，超声波功率为180W。在此条件下，红松树皮多酚的得率为7.18%，抗氧化活性最强，IC50值为4.3mg/mL。本研究结果为红松树皮多酚的应用及其相关产品的开发提供了技术支持。
参考文献：
[1]周双萍，王勇民，刘春宝.红松树皮多酚药理作用的研究进展[J]，安徽农学通报，2012，18（1）：15-17.
[2]张金凤，许金明.红松树的药用价值评价研究进展[J]，贵州农业科学，2014，42（1