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诱变选育雄烯二酮高产菌株及其发酵条件研究 一、绪论 雄烯二酮(androstenone)是一种存在于猪和其他哺乳动物体内的内源性雄激素,在猪肉中含量较高。但是,受雄烯二酮异味的影响,猪肉的食用品质受到严重影响,严重影响了猪肉的市场销售。 因此,为了解决这个问题,学者们开始寻找各种方法减少猪肉中雄烯二酮的含量。其中,选育高产菌株是其中一个方向。选择高产菌株可通过诱变等方式来实现。 二、诱变选育雄烯二酮高产菌株 1.诱变原理 诱变是指在一定条件下,一些随机发生的基因突变导致个体的基因组发生变化,从而产生新型的生物个体或体细胞。所谓“诱变”,即特意或自然地诱导生物产生基因突变。易诱发诱变的物理或化学因素称为诱变剂。 利用诱变剂可使得细菌经历基因突变,从而产生新型菌株。常用的诱变因子有化学诱变剂、放射性诱变剂等。化学诱变剂主要包括N-甲基-N'-亚硝基-N-亚甲基胍(MNNG)、硝酸盐等,这些诱变剂可协助在DNA中引入肟基、亚硝基等标记基团,引发突变。 2.雄烯二酮高产菌株的选育 雄烯二酮高产菌株的选育主要包括以下三个步骤: (1)筛选适宜的基础菌株 适宜作为诱变试验菌株的必要条件是具有一定的生物学特性,并且对诱变剂具有一定的敏感性,易于实现目标诱变。 (2)诱变 将选择的菌株经过诱变,引入新的基因突变,从而使繁殖后代达到更好的效果。 (3)选择和鉴定优良菌株 在诱变后的群体中,需通过筛选不同基因型的菌株,最优良菌株对雄烯二酮的高产率高,同时不会使得微生物表现出不良性状。 三、发酵条件研究 雄烯二酮高产菌株的产量与发酵条件密切相关,因此对发酵条件的研究对高产雄烯二酮有非常重要的意义。 1.确定合适的基础培养基 对于任何微生物种群,其繁殖都需要适合的营养,因此,合适的基础培养基是产生高产菌株的关键。通常情况下,Luria-Bertani培养基或是2XTY培养基是较好的选择。在遇到每一个批次菌株时,需要基于不同的基础培养基,由实验确定哪个最适合分离所选菌株。在培养基优化之后,容易使得菌株量大且勃勃生机。 2.合适的发酵温度 对于不同的微生物来说,其生长温度是不同的,因此,需要针对不同微生物设立合适的生长温度,因为不当的生长温度往往不利于菌株增值和生化代谢,最终导致本质上的雄烯二酮产量下降。 3.利用制剂生物(bioformulation)技术 生物制剂技术是指在一定条件下将微生物、其衍生物、酵母等微生物所产生的有益物质和组织部分稳定化、包裹、制成制剂(如固体、液体或半固体)。制剂可以在培养杂交环境中保护微生物和其代谢产物,同时,另外一些活性成分可以用来提高菌株的营养,从而产生更多的雄烯二酮。 四、结论 经过诱变选育雄烯二酮高产菌株,以及对其发酵条件的研究,可以显著降低猪肉雄烯二酮含量,提高猪肉的品质,增加销售价值。通过技术的不断创新和发展,预计这种方法将在未来得到更广泛的应用。