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蛋白质的反相液相色谱保留方程研究
蛋白质的反相液相色谱保留方程研究
摘要：
反相液相色谱技术在蛋白质层析中得到了广泛的应用。本文介绍了蛋白质反相液相色谱保留方程的研究进展，分析了影响蛋白质保留的因素，包括酸度、盐浓度、有机溶剂浓度、温度等。同时，本文还重点介绍了反相液相色谱方法中常用的配对离子对及对质子化肽段的液相环境对保留的影响。最后，强调了对蛋白质反相液相色谱保留方程的深层次的研究有助于提高蛋白质的色谱分离效率及保留稳定性。
关键词：蛋白质；反相液相色谱；保留方程；液相环境
Abstract：
Reversephaseliquidchromatographytechnologyhasbeenwidelyusedinproteinseparation.Thispaperintroducestheresearchprogressofproteinreversephaseliquidchromatographyretentionequation,analyzesthefactorsaffectingtheretentionofproteins,includingacidity,saltconcentration,organicsolventconcentration,temperatureandsoon.Atthesametime,thispaperintroducesindetailtheimpactoftheliquidenvironmentofcommonlyusedpairedionsandprotonatedpeptidesegmentsinreversephaseliquidchromatographyonretention.Finally,itemphasizesthatdeepresearchontheretentionequationofproteinreversephaseliquidchromatographycanimprovethechromatographicseparationefficiencyandretentionstabilityofproteins.
Keywords:Protein;ReversePhaseLiquidChromatography;RetentionEquation;LiquidEnvironment
简介：
蛋白质是生物体中最为重要的大分子有机物之一，对于蛋白质的分离和纯化，尤其是在尽可能多的情况下很难实现。然而，反相液相色谱（RP-HPLC）和其他基于高性能液相色谱（HPLC）的技术已经广泛应用于蛋白质层析技术中。
随着反相液相色谱技术的不断发展，越来越多的研究表明，液相条件是影响蛋白质分离的主要因素之一。本文将重点介绍蛋白质反相液相色谱保留方程的研究进展。
一、影响蛋白质保留的因素：
1.酸度
在反相液相色谱中，酸度是影响蛋白质分离的重要因素之一。过高的酸度可能会使蛋白质表面带正电，从而增加相互作用力，导致蛋白质在柱上过度定位并使其分离失效。所以较低的pH对蛋白质的保留更优。
2.盐浓度
钠盐和钾盐对影响蛋白质的保留也非常重要。一般来说，盐浓度较高会增加蛋白质与固定相互作用的力度，并增加蛋白质的定位时间。
3.有机溶剂浓度
在反相液相色谱中，有机溶剂的浓度也是影响蛋白质保留的一个重要因素。随着有机溶剂浓度的增加，非极性相互作用的力量会加强，蛋白质也会更容易被保留。
4.温度
温度同样可以影响反相液相色谱分离蛋白质的效率。通常情况下，随着温度的升高，蛋白质的定位时间会变短，但是若温度太高则容易导致蛋白质失活。
二、常用液相
1.配对离子对
常见的离子对包括酸-酸、碱-碱、酸-碱。配对离子对可以使pH稳定并影响固定相表面的离子性质，从而影响保留。例如，过氧化钙配对酸对可大幅改善C18相表面的性质，从而改善蛋白质的保留特性。
2.对质子化肽段的液相环境
对质子化肽段的液相环境比物理条件更能影响蛋白质的保留。弱酸和弱碱的缓冲剂可以保证液相环境的稳定，从而使蛋白质在整个色谱分析过程中更好地保留。
总的来说，随着反相液相色谱技术的发展和深入研究，液相条件对蛋白质保留的影响将会日益凸显。因此，对蛋白质反相液相色谱保留方程的深入研究对提高蛋白质色谱分离效率及保留稳定性具有重要的意义。
参考文献：
1.López-Ferrer,D.,&Ochoa,N.(2018).Recentdevelopmentsinreversed-phaseliquidchromatographyfortheanalysisofproteinsandpeptides.Electrophoresis,39(1),54-67.
2.Luo,Q.,He,C.,&Liu,K.(2019).Reversed-phase