NO抑制拟南芥花的转换.ppt

NO抑制拟南芥花的转换NitricoxiderepressestheArabidopsisfloraltransitionScience,2004,305PeiZMetal.主要内容：1.拟南芥花的转型拟南芥的开花控制主要路径的相互关系2.信号分子一氧化氮3.一氧化氮与拟南芥花的转型不同SNP浓度对芽生长的影响通过观察玫瑰叶的数目和抽苔（在成花时快速向上生长）需要的天数，发现SNP对开花有延迟作用有浓度依赖性。

开花时间判断的标准是在第一朵花形成之前主芽上的叶子数目（开花越迟的植物叶子越多）。2）.内源NO抑制花的转型我们使用NO敏感性（对根生长的抑制作为指标）来筛选nox突变体（上调NO释放的突变体）。其中nox1可以为研究NO功能提供很大的帮助。在nox1突变株中根的生长状况，nox1过量生成NO。在nox1和WT中内源NO的水平。叶子用DAF-2DA染色，荧光的激发波长为490nm,发射波长515nm，使用相同的曝光时间（光镜照片如下）。Fig.3.VisualizationofNOincrosssectionsfromthebasalpartofmungbeanhypocotylcuttingstreatedwithCO,HematinandcPTIObylaserscanningconfocalmicroscopeusingDAF-2DA
(A)CKfor0h,(B)CKfor12h,(C)CKfor36h,(D)CKfor48h,(E)CKfor60h,(F)Hematin(10μmol/L)for36h,(G)COgasaqueoussolutionwith100.0%saturationfor12h,(H)COgasaqueoussolutionwith100.0%saturationfor36h,(I)COgasaqueoussolutionwith100.0%saturationfor48h,(J)COgasaqueoussolutionwith100.0%saturationfor60h,(K)CKfor36handthen500μmol/LcPTIO,(L)Hematin(10μmol/L)for36handthen500μmol/LcPTIO,(M)COgasaqueoussolutionwith100.0%saturationfor36handthen500μmol/LcPTIO.Upperanddownlaneofeachtreatmentswerepicturesexaminedbylaserscanningconfocalmicroscopeandcorrespondingbright-fieldimages.V,vascularbundles.Bar=100µm3).NOX1与CUE1的关系cue1不能达到nox1的显型水平

在所有的六个nox1等位基因中，删除CUE1基因。因为NO是L-Arg在NOS的作用下转变为L-Cit时产生，所以cue1突变体的自由L-Arg和L-Cit比WT的高好几倍，导致nox1过量分泌NO。我们有充分理由认为CUE1基因的中断会增加内源的L-Arg浓度，进一步转变成NO。由此可见，具有专一氨基酸突变的nox1和cue1-5突变株确实比WT含有更多的L-Arg，L-Cit和NO，表明依赖于NOS的NO生成确实存在于拟南芥中。土壤中生长的nox1和cue1突变体开花较迟上述现象严格地受到一定光周期的影响，当光照和黑暗时间比为16/8，12/12和8/16时植物叶子的数量分别增加18%,61%,and17%，与cue1突变体中表现出的依赖于光的现象一致。4).内源NO的下调促进花的转型拟南芥的开花控制主要路径的相互关系5).NO调控控制花转型的基因的表达SNP抑制LFY的表达对浓度有依赖性。LFY在nox1中表达比WT低，但在nos1植物中的含量与WT比高。LFY和内源NO之间的关系暗示NO部分的通过LFY介导对花的转型的抑制作用。拟南芥的开花控制主要路径的相互关系基因易位显性分析NO和GA、自动途径的关系nox1和自动途径的突变株长光照和短光照开花都迟，我们认为nox1可能影响此通路。由于自动通路通过FLOWERINGLOCUSC(FLC)（开花抑制基因），而自动途径的开花延迟的突变株常常表达大量的FLC。拟南芥的开花控制主要路径的相互关系低浓度的SNP（≤50µM）处理可以减少FLC的表达，高浓度的SNP（>50µM）恰恰相反，FLC的表达在nox1比WT高，但在nos1含量比WT略低。然而，用高剂量NO处理的WT植株或nox1的开花延迟现象可能是通过对FLC的上调，也可能是由独立于FLC的成分导致。虽然如此，nox1﹑WT和nos1的开花性状与FLC的表达