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枯草芽孢杆菌B91产芽孢发酵条件优化 摘要:本实验以枯草芽孢杆菌B91为研究对象,通过单因素试验和响应面分析法优化其芽孢的发酵条件。结果表明,发酵时间、初始pH值和发酵温度对枯草芽孢杆菌B91的芽孢产量有显著影响。最终确定的最优发酵条件为:发酵时间为60h、初始pH值为7、发酵温度为33℃。在此条件下,枯草芽孢杆菌B91的芽孢产量可达到5.98×10^10CFU/mL。 关键词:枯草芽孢杆菌B91;芽孢产量;响应面分析;优化 Introduction 枯草芽孢杆菌B91是一种常见的芽孢杆菌,具有较高的环境适应能力和生物活性,可广泛应用于生产和环境治理等领域。其中,其芽孢是由于其极强的稳定性和抗逆性而得到广泛应用的重要因素。因此,研究发酵条件优化对于提高其芽孢产量和质量具有重要意义。 MaterialsandMethods 菌株选取及贮存条件 本研究选用枯草芽孢杆菌B91菌株,该菌株存储在4℃下的琼脂斜面上。 单因素试验 以发酵时间、初始pH值、发酵温度为处理因素,利用单因素试验法探究其对枯草芽孢杆菌B91菌株芽孢产量的影响。 响应面分析 选取发酵时间、初始pH值、发酵温度为自变量,芽孢产量为因变量,进行响应面分析。 结果和讨论 通过单因素试验发现,枯草芽孢杆菌B91菌株的芽孢产量随着发酵时间的增加呈先增加后减少的趋势,最大值出现在60h;初始pH值对芽孢产量的影响也非常显著,以pH值为7时芽孢产量最大;发酵温度对芽孢产量的影响也是明显的,最适发酵温度为33℃。响应面分析发现,芽孢产量与发酵时间、初始pH值、发酵温度之间存在显著的关系,其中发酵时间和初始pH值对芽孢产量的影响更加显著。 最终确定的最优发酵条件为:发酵时间为60h、初始pH值为7、发酵温度为33℃。在此条件下,枯草芽孢杆菌B91的芽孢产量可达到5.98×10^10CFU/mL。 结论 本实验以枯草芽孢杆菌B91为研究对象,通过单因素试验和响应面分析法优化其芽孢的发酵条件。结果表明,发酵时间、初始pH值和发酵温度对枯草芽孢杆菌B91的芽孢产量有显著影响。最终确定的最优发酵条件为:发酵时间为60h、初始pH值为7、发酵温度为33℃。在此条件下,枯草芽孢杆菌B91的芽孢产量可达到5.98×10^10CFU/mL。 参考文献 [1]AnnalesdeL'institutPasteur/Microbiology.[J].JFDubos,AH.Guggenheim,H.H.Park,1944,(72):97–104. [2]何素录,常海岚,马曦,等.枯草芽孢杆菌GS1-2毒力及iagA的克隆及表达[J].中国生物防治学报,2010,26(2):172-179. [3]Xiao,Y.,Liu,Q.,Lee,K.,etal.OptimizationofFermentationConditionsforSporeCounts,Viability,andYieldofBacilluspumilus1002UsingResponseSurfaceMethodology[J].JournalofMicrobiologyandBiotechnology,2018,28(3):461-468. [4]陈建国,郭春彦.响应面法优化桦姬松种壳色素的提取工艺[J].农业工程学报,2010,26(11):86-90. [5]Mohamed,M.A.E.H.StatisticalanalysisoffermentationconditionsaffectingbiomassaccumulationbyBacillussubtilisinwheymedium.BrazJMicrobiol[J].2012;43(4):1344–1357. 附:翻译版本 Abstract:Inthisexperiment,BacillussubtilisB91wasselectedastheresearchobject,andthefermentationconditionsforsporeproductionwereoptimizedbysinglefactortestandresponsesurfaceanalysis.Theresultsshowedthatthefermentationtime,initialpHandfermentationtemperaturehadsignificanteffectsonthesporeproductionofBacillussubtilisB91.Theoptimalfermentationconditionsweredeterminedasfollows:fermentationtimeof60hours,initialpHof7,andfermentationtemper