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微生物发酵法生产γ-氨基丁酸的研究进展 摘要: γ-氨基丁酸是一种重要的神经递质,在医学、食品、饲料等领域具有广泛应用。传统γ-氨基丁酸生产工艺存在能耗高、成本高等问题,微生物发酵法成为一种可行的替代方法。本文综述了近年来微生物发酵法生产γ-氨基丁酸的研究进展,包括菌种筛选、发酵条件优化、发酵剂量控制、废物回收利用等方面,为新型γ-氨基丁酸生产工艺的优化和发展提供了参考。 关键词:γ-氨基丁酸,微生物发酵,菌种筛选,发酵条件优化,废物回收利用。 1.引言 γ-氨基丁酸(γ-aminobutyricacid,GABA)是一种广泛分布于动物和植物中的神经递质,除了在生理学上的重要作用外,还具有调节神经系统、降低血压、缓解焦虑等药理学功效(李兴华等,2016)。因此,GABA被广泛应用于医药、保健食品、饲料等领域,并具有巨大市场潜力。 传统GABA生产工艺使用化学合成或生物法,但存在能耗高、成本高等问题。因此,近年来,微生物发酵法成为一种可行的替代方法,具有反应条件温和、原料来源广泛、反应产物纯度高等优点。本文综述了近年来微生物发酵法生产GABA的研究进展,为新型GABA生产工艺的优化和发展提供了参考。 2.菌种筛选 微生物发酵法生产GABA主要采用乳酸菌和大肠杆菌等菌种。乳酸菌作为生物催化剂,在Glu转GABA的反应中起着关键作用。乳酸菌能够产生丰富的GABA转移酶(GABA-T),并且酸奶、发酵蔬菜等均含有大量的乳酸菌。大肠杆菌则是质粒表达法生产GABA的常用菌种,多数研究表明,通过转化介导的质粒表达系统可以实现GABA大规模生产并且产物纯度较高(Aroraetal.,2018)。 3.发酵条件优化 GABA发酵是一个复杂的过程,需要精细的调控和优化。主要考虑影响Glu转GABA反应的各种因素,包括温度、初始pH、营养成分、转化时间和转化压力等。 3.1温度 温度是影响GABA发酵的最重要因素,其发酵温度一般在30-42℃之间。高于42℃或低于30℃时,微生物种类的生长和代谢会明显下降,导致GABA产量下降。 3.2初始pH 在GABA的酸碱度调节方面,ph值是一个比较重要的因素,一般将其控制在5.0-6.0,此阶段主要由初始pH的设定决定。 3.3营养成分 碳源以及氮源是影响GABA发酵产量的重要因素。研究表明,蔗糖作为主要碳源时,可显著提高GABA发酵产量。对于氮源,氨基酸(如谷氨酸)和氨态氮(如尿素)都是常用的氮源,在一定程度上提高了GABA的产量和转化效率(Wangetal.,2016)。 3.4转化时间 转换时间是一个重要参数,短的时间不能充分利用基质,而长的时间则有可能引起结构涵盖等,并影响其口感。 3.5转化压力 乙酰胆碱通过提示转氨酶介导的转化大幅度提高GABA产量。氧气是影响氨基酸代谢的重要因素,氧气浓度控制在0.2%-5%参与发酵时,有助于良好的生长状态。 4.发酵剂量控制 发酵液中的Glu和GABA量会随时间的推移而变化,这就需要通过监测经过一定时期的Glu转GABA反应后的产物GABA含量的增长来实现发酵剂量的控制。在合理的发酵剂量范围内,可实现GABA产量的最大化并且提高产物质量(Tangetal.,2015)。 5.废物回收利用 微生物生产过程中,生产废物和中间体产生大量,如何利用这些废物和中间体,降低生产成本和环境污染,成为当今工业化生产发展的一个关键问题。反渗透技术可以将GABA浓缩至一定浓度,如20-30USCg⁄mL,液态化淀粉、生物质量、短尾根、茶废和酒糟等中间产物,可用来作为底物,进一步降低工艺成本。 6.总结 微生物发酵法生产GABA是一种高效、可行的替代方法,可以解决传统合成工艺成本高等问题。菌种筛选、发酵条件优化、发酵剂量控制、废物回收利用等均可优化新型GABA生产工艺的发展,有利于推广GABA的生产和应用。对未来的研究者而言,应该深度研究发酵对GABA产量和转化效率的影响机理,开发新型发酵剂量控制技术,并寻求更加可持续化、高效化的废物回收利用方式,进一步推动GABA工业化生产。