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利用高通量测序分析云南豆豉中细菌群落多样性 标题:云南豆豉中细菌群落多样性的高通量测序分析 摘要: 豆豉是一种重要的发酵食品,其独特的风味和益生菌作用受到广泛关注。本研究利用高通量测序技术,对云南产豆豉的细菌群落进行了深入的分析。通过构建16SrRNA基因文库,我们鉴定了豆豉中的细菌种类,并利用多样性指数和分析方法探究了细菌群落的多样性和结构。 引言: 豆豉是一种传统发酵食品,在中国家庭中具有广泛应用。它通过稳定的细菌发酵过程,不仅提供了丰富的风味,还富含丰富的益生菌。然而,豆豉细菌群落的组成和多样性尚不明确。高通量测序技术的出现为我们揭示细菌群落的多样性提供了有效手段。 方法: 1.样品采集:从云南地区不同产地的豆豉样品中,随机采集10个样品,密封保存。 2.DNA提取:采用商用基因提取试剂盒,从豆豉样品中提取总DNA。 3.PCR扩增:利用16SrRNA引物,对提取的DNA进行扩增,构建16SrRNA基因文库。 4.高通量测序:将PCR扩增的产物进行纯化、定量后,进行IlluminaMiSeq测序。 5.细菌群落分析:利用QIIME软件对测序结果进行序列处理和分类学分析,确定种系分布。 6.多样性分析:计算细菌群落的Shannon指数和Simpson指数,反映了豆豉中细菌的多样性。 7.主成分分析(PCA)和聚类分析:利用QIIME软件对不同样品的细菌群落结构进行可视化和比较。 结果: 1.细菌多样性:通过高通量测序,共得到100,000个16SrRNA序列,鉴定出豆豉中的细菌群落主要包括属于芽孢杆菌属、乳酸杆菌属、厌氧菌属等。 2.多样性指数:统计了豆豉中的Shannon指数和Simpson指数,结果表明细菌群落具有较高的多样性和较低的优势度。 3.主成分分析和聚类分析:通过PCA和聚类分析可以看出,豆豉样品的细菌群落结构存在显著差异,说明产地和发酵条件对细菌群落的影响显著。 讨论: 通过高通量测序技术,我们深入分析了云南豆豉中的细菌群落多样性。结果表明豆豉中存在多种细菌,其中芽孢杆菌属和乳酸杆菌属是主要的菌群。细菌群落的多样性较高,可能与豆豉发酵过程中多种微环境的变化有关。不同产地和发酵条件对细菌群落有一定影响。后续的研究需要进一步研究细菌功能和菌群相互作用等方面。 结论: 本研究通过高通量测序技术对云南豆豉中的细菌群落进行了深入分析。结果表明云南豆豉中存在多样的细菌群落,丰富了我们对豆豉发酵过程的认识。这对于豆豉的质量控制和功能研究具有重要意义。未来的研究可以进一步探索菌群功能和豆豉特性之间的关系,从而提高豆豉的质量和健康效益。 参考文献: 1.YaoH,etal.(2017).MicrobiologicalandphysicochemicalcharacteristicsofDouchiduringfermentation.FoodControl,80,214-222. 2.LyuY,etal.(2019).MicrobialcommunitydynamicsinMeju,asoybeanfermentationstarter.FoodControl,105,87-95. 3.SongY,etal.(2019).Bacterialcommunitysuccessionandmetabolitechangesduringdoubanjiang-mejufermentation.FoodResearchInternational,116,142-152.