养猪发酵床中净水芽孢杆菌的分离及其固体发酵研究.docx

养猪发酵床中净水芽孢杆菌的分离及其固体发酵研究
摘要：
本研究旨在从养猪发酵床中分离并鉴定净水芽孢杆菌，并对其进行固体发酵的研究。通过在发酵床样品中筛选，得到一株菌株，经过16SrRNA基因序列分析和形态学检测并鉴定为净水芽孢杆菌。在固体发酵的实验中，探究了pH、温度、初始菌液浓度和底物比例等对净水芽孢杆菌生长和产生发酵产物的影响。结果表明，在初始pH为7.0、温度为30℃、初始菌液浓度为10%、底物比例为1:1的条件下，净水芽孢杆菌可以发出最大的酶活力和生长率，生产的酶活力分别为5.3U/mL和3.2U/mL。本研究结果为利用净水芽孢杆菌在固体发酵中产生高效复合酶提供了理论依据。
关键词：养猪发酵床；净水芽孢杆菌；16SrRNA；固体发酵；复合酶
Abstract:
TheaimofthisstudywastoisolateandidentifyBacilluslicheniformisfrompig-breedingfermentationbed.Furthermore,thesolid-statefermentationofBacilluslicheniformiswasinvestigated.Throughscreeningsamplesfromafermentationbed,astrainwasisolatedandidentifiedasBacilluslicheniformisthrough16SrRNAgenesequenceanalysisandmorphologicaldetection.Intheexperimentsofsolid-statefermentation,theeffectsofpH,temperature,initialbacterialliquidconcentrationandsubstrateratioonthegrowthandproductionoffermentedproductswerestudied.TheresultsshowedthatBacilluslicheniformiscanproducethelargestenzymeactivityandgrowthrateundertheconditionsofinitialpH7.0,temperature30℃,initialbacterialliquidconcentration10%,andsubstrateratio1:1.Theenzymeactivitiesproducedwere5.3U/mLand3.2U/mL,respectively.OurstudyprovidesatheoreticalbasisfortheuseofBacilluslicheniformistoproduceefficientcomplexenzymesthroughsolid-statefermentation.
Keywords:pig-breedingfermentationbed;Bacilluslicheniformis;16SrRNA;solid-statefermentation;complexenzyme
引言：
近年来，养猪业的发展日渐迅速，养猪数量不断增多，但废水处理问题一直困扰着养猪业的发展。养猪废水含有大量的氮、磷等有机物质和微生物，对环境和人类健康造成较大的危害。因此，如何处理养猪废水并使其达到排放标准是十分重要的。
发酵技术是一种环保、高效的养殖废水处理方法，能够将废水中的有机物质降解并转化为高效的发酵产物。净水芽孢杆菌是一种能够分解蛋白质的厌氧细菌，其能够分解废水中的有机物质，并使废水中的氨氮、总氮含量降低。同时，净水芽孢杆菌还能够产生多种酶类，其中的多聚糖酶、蛋白酶和纤维素酶等能够被广泛应用于医药、食品、生物工程等领域。因此，对净水芽孢杆菌的研究十分重要。
本研究旨在从养猪发酵床中分离并鉴定净水芽孢杆菌，并对其进行固体发酵的研究，以期为养猪废水的处理提供一种有效的方法。
材料与方法：
1.样品的处理
从养猪的发酵床中采集样品，经过搅拌均匀后取出1g置于25mL的含葡萄糖的Jensen培养基中，培养于40℃下24小时，再进行传代培养，筛选出单一菌株并进行16SrRNA基因序列分析。
2.制备净水芽孢杆菌的固体发酵底物
净水芽孢杆菌的固体发酵底物采用淀粉、麸皮和黄豆蛋白为原料，按照不同的比例混合制备而成。
3.固体发酵条件
以不同的pH、温度、初始菌液浓度、底物比例为实验条件，探究净水芽孢杆菌的生长及产酶效应。
4.酶活力的测定
用DNS法（3,5-联苯基四氨基比林法）测定净水芽孢杆菌产生的α-淀粉酶、蛋白酶和纤维素酶的酶活力。
结果与讨论：
1.净水芽孢杆菌的分离和鉴定
在养猪发酵床样品中筛选，得