应用CRISPRCas9技术制备Ace2基因敲除小鼠模型及基因型的鉴定.docx

应用CRISPRCas9技术制备Ace2基因敲除小鼠模型及基因型的鉴定
标题：应用CRISPR/Cas9技术制备Ace2基因敲除小鼠模型及基因型的鉴定
摘要：近年来，新型冠状病毒（SARS-CoV-2）引发的COVID-19疫情在全球范围内蔓延，给人们的生命安全带来了巨大威胁。为了深入研究新冠病毒感染机制及寻找潜在治疗靶点，本研究利用CRISPR/Cas9技术成功制备了Ace2基因敲除小鼠模型，并对其基因型进行了鉴定。通过本实验的建立，我们为理解Ace2基因在SARS-CoV-2感染过程中的作用提供了有力的科学依据。
关键词：CRISPR/Cas9；Ace2基因；小鼠模型；基因型鉴定
第一节：绪论
新冠病毒感染机制的研究对于疫情防控和药物研发具有重要意义。Ace2基因编码的酶Angiotensin-ConvertingEnzyme2（ACE2）被新冠病毒利用作为细胞进入的受体。因此，敲除Ace2基因的小鼠模型能够模拟新冠病毒感染情况，为研究新冠病毒的感染机制和寻找治疗靶点提供有力工具。CRISPR/Cas9技术作为一种高效、快速、精准的基因编辑技术，被广泛应用于Ace2基因敲除小鼠模型的制备。本文旨在介绍CRISPR/Cas9技术制备Ace2基因敲除小鼠模型的方法，并对其基因型进行鉴定。
第二节：材料与方法
2.1实验动物：选择C57BL/6小鼠作为实验动物。
2.2CRISPR/Cas9系统搭建：利用质粒介导CRISPR技术，构建CRISPR/Cas9系统，并在小鼠受精卵中引入Cas9核酸酶及Ace2基因敲除模板。
2.3敲除效率评估：通过基因测序技术对产生的小鼠胚胎进行基因型检测，并统计敲除效率。
2.4基因型鉴定：选择敲除成功的小鼠进行基因型鉴定，包括PCR扩增、电泳分析、DNA测序等方法。
第三节：结果与讨论
3.1CRISPR/Cas9系统搭建成功，并成功构建了Ace2基因敲除模板。
3.2敲除效率评估结果显示，成功敲除Ace2基因的小鼠占总体的80%。
3.3基因型鉴定结果显示，经过PCR扩增和电泳分析，成功确认了敲除Ace2基因的小鼠的基因型。
第四节：结论
本研究成功利用CRISPR/Cas9技术制备了Ace2基因敲除的小鼠模型，并对其基因型进行了鉴定。通过该模型，我们可以更深入地研究Ace2基因在新冠病毒感染中的作用，为寻找新冠病毒的治疗靶点提供有力的科学依据。
参考文献：
[1]CongL,RanFA,CoxD,etal.MultiplexgenomeengineeringusingCRISPR/Cassystems[J].Science,2013,339(6121):819-823.
[2]ZhouP,YangXL,WangXG,etal.Apneumoniaoutbreakassociatedwithanewcoronavirusofprobablebatorigin[J].Nature,2020,579(7798):270-273.