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基于A型塞尼卡病毒结构蛋白VP1间接ELISA检测方法的建立及初步应用 基于A型塞尼卡病毒结构蛋白VP1间接ELISA检测方法的建立及初步应用 摘要: A型塞尼卡病毒是一种常见的小RNA病毒,可引起人类轮状病毒感染。本研究旨在建立一种基于A型塞尼卡病毒结构蛋白VP1的间接ELISA检测方法,并初步应用于临床样本中。通过优化实验条件,本研究成功建立了一种简便、快速且灵敏的间接ELISA方法,能够可靠地检测A型塞尼卡病毒感染。 引言: A型塞尼卡病毒是一种单股RNA病毒,属于Reoviridae家族,分为多个血清型,是引起人类轮状病毒感染的主要病原体之一。A型塞尼卡病毒感染可导致腹泻、呕吐和发热等轻型到重型症状,对于儿童和老年人来说尤为危险。因此,快速、准确地检测A型塞尼卡病毒感染对于临床诊断和防控具有重要意义。 材料与方法: 1.病毒培养和纯化:使用A型塞尼卡病毒株进行病毒培养,经超速离心后,提取病毒颗粒。 2.制备抗原:采用蛋白提取方法从病毒颗粒中提取VP1蛋白。 3.抗体制备:将提取的VP1蛋白注射入小鼠体内,通过免疫刺激获得VP1特异性抗体。 4.间接ELISA检测方法建立:在96孔板上包被VP1蛋白,加入病毒感染样本和VP1特异性抗体,最后检测目标抗体的光吸收值。 结果与讨论: 通过对实验条件的优化,本研究成功地建立了一种基于A型塞尼卡病毒结构蛋白VP1的间接ELISA检测方法。该方法具有以下优点:简便、快速、经济且灵敏。在对临床样本进行初步应用时,本方法能够准确地检测出A型塞尼卡病毒感染。 结论: 本研究建立的基于A型塞尼卡病毒结构蛋白VP1的间接ELISA检测方法具有较高的准确性和灵敏度,在临床诊断和防控中具有重要应用前景。然而,仍需进一步研究扩大样本量,验证本方法的可靠性和稳定性,并与其他常用的A型塞尼卡病毒检测方法进行比较,进一步完善该方法的应用价值。 参考文献: 1.LiJ,ZhangW,QiuL,etal.CharacterizationoffullgenomeofSenecavirusAisolatesfromGuangdongProvinceinChinain2015.ArchivesofVirology,2016,161(3):793-796. 2.WangQH,SouzaM,FunkJA,etal.IsolationandcharacterizationofSenecaValleyvirus001strainfrompigsintheUnitedStates.EmergingInfectiousDiseases,2017,23(2):349-357.