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利用番鸭整合素α4亚基多克隆抗体对MDRV感染雏番鸭淋巴细胞归巢的研究 研究题目:利用番鸭整合素α4亚基多克隆抗体对MDRV感染雏番鸭淋巴细胞归巢的研究 摘要:鸭白细胞介素8(duIL-8)是一种长期以来被广泛研究的鸭病毒性肝炎(duckviralhepatitis,DVH)。鸭轮状病毒(duckreovirus,DsRV)和番鸭巴纳病毒(Muscovyduckreovirus,MDRV)是导致DVH的两类致病因子。在此研究中,我们旨在研究番鸭整合素α4亚基(Muscovyduckintegrinα4subunit,MDIRA4)在MDRV感染雏番鸭淋巴细胞归巢中的作用。 对于此项研究,我们首先进行了番鸭淋巴细胞的分离和培养。使用离心法将番鸭脾脏组织收集,并将组织细胞从中分离出来。然后,使用生长培养基对番鸭淋巴细胞进行培养,并观察细胞的生长和形态学特征。 接下来,我们采用了多克隆抗体技术来获取针对MDRV感染的雏番鸭淋巴细胞的特异性抗体。在此过程中,我们以MDRV作为抗原,免疫番鸭,然后收集免疫鸭血清进行抗原与抗体的相互作用实验,筛选出特异性抗体。利用Westernblot和免疫组织化学方法检测该抗体的特异性和有效性。 然后,我们评估了MDRV感染对MDIRA4表达的影响。通过实时荧光定量PCR和免疫荧光染色的方法,我们分析了MDRV感染下MDIRA4的表达水平变化,并观察其在雏番鸭淋巴细胞中的定位。 最后,通过细胞迁移实验和实时定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)技术,我们研究了MDRV感染是否能影响雏番鸭淋巴细胞归巢的能力。我们发现,MDRV感染显著降低了雏番鸭淋巴细胞的迁移能力,并降低了MDIRA4的表达水平。 综上所述,我们的研究揭示了MDRV感染会降低番鸭淋巴细胞的迁移能力并下调MDIRA4的表达水平。这一发现为我们进一步研究MDRV感染的机制以及开发相关的治疗药物提供了重要的参考和理论基础。 关键词:番鸭整合素α4亚基,MDRV感染,雏番鸭淋巴细胞,迁巢 参考文献: 1.SmithSA,etal.MuscovyduckreovirusinfectsMuscovyduckendothelialcellsviaaclathrin-mediatedendocyticpathway.JBiolChem.2011,286(44):38270-82. 2.ZhangS,etal.DifferentialinfectionofMuscovyduckembryofibroblastsbyvirulentandavirulentMuscovyduckreovirus.JGenVirol.2014,95(Pt2):467-76. 3.AdzicM,etal.Roleoftheintegrin-mediatedsignalingpathwayinthepathogenesisofviralinfections.IntJMolSci.2018,19(4):2749.