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低温大曲酵母菌分离和计数培养方法优化
摘要
为了优化低温大曲酵母菌分离和计数的培养方法，我们采用了多种培养基和不同温度的条件进行了比较和分析。结果显示TSA培养基及其改良型对低温大曲酵母菌的生长和计数是最适合的，同时在10℃的低温条件下培养获得的计数结果比较准确。
关键词：大曲酵母菌，低温，计数，培养方法优化
引言
大曲酵母菌是酿酒酵母中的主要组成部分，广泛应用于啤酒、葡萄酒、白酒等酒类的生产过程中。然而，在低温下，大曲酵母菌的数量和活力会受到很大的影响，从而影响到酒类的质量和产量。因此，优化低温下大曲酵母菌的分离和计数方法是十分必要的。
目的
本次实验旨在探究优化低温大曲酵母菌分离和计数的培养方法，以提高计数精度以及对大曲酵母菌的生长情况进行评估。
方法
1.大曲酵母菌的分离
取不少于10g的大曲样品，加入50ml的生理盐水中，振荡5min后进行10倍稀释。然后，取适量的液体分别涂覆于不同培养基上，包括TSA、改良TSA(TSA+7.5%NaCl)、MYP培养基、SDA培养基等四种常规培养基，以及五个不同pH值的改良TSA(pH=5.5,6.0,6.5,7.0,8.0)。接着，分别在28℃和10℃下进行孵育，观察各种培养基下大曲酵母菌的生长情况，挑选适宜的培养基进行计数培养。
2.大曲酵母菌的计数
对于大曲酵母菌的计数，我们采用了白色计数板，将涂有合适浓度的培养液均匀遍布于计数板上，然后观察并计算计数板上的生长菌落数量。对于不同的培养基，需要确定较为合适的计数液浓度，例如液体的OD600在0.5~1.0范围内。同时，每组实验重复三次，统计平均值和标准差，以保证计数的准确性和可靠性。
结果与分析
1.大曲酵母菌的分离结果
在28℃下，TSA、改良TSA、MYP和SDA培养基下均可以支持大曲酵母菌的生长。不过，在10℃下，除了改良TSA外，其他各种培养基都不能支持大曲酵母菌的生长。此外，在具有不同pH值的改良TSA中，pH=6.5的改良TSA对大曲酵母菌的生长最为适宜。
2.大曲酵母菌的计数结果
根据培养基分离的结果，我们选取了TSA、改良TSA和pH=6.5的改良TSA作为计数培养基。结果显示，在10℃的低温环境下，TSA和改良TSA两种培养基下获得的大曲酵母菌计数结果相近，但在28℃下差异比较大。而pH=6.5的改良TSA对于大曲酵母菌的计数结果与生长情况相对较差。总的来说，在低温条件下，TSA培养基及其改良型对大曲酵母菌计数最适宜。
结论
通过本次实验的比较和分析，我们得出以下结论：
1.TSY和改良TSA是低温大曲酵母菌分离的最适宜的培养基，而且在10℃的低温条件下结果比较准确。
2.在低温环境下，TSA培养基及其改良型是计数大曲酵母菌最适宜的培养基。
3.pH=6.5的改良TSA对于大曲酵母菌甚至是不适宜的。
因此，我们建议在大曲酵母菌的分离和计数过程中使用TSA及改良型的TSA培养基，同时注意在低温环境下的应用与实验控制。
参考文献：
1.李华,陈文华.大曲酵母菌生理特性及其工艺应用.酿酒科技,2018,7:81-84.
2.李颖,马海涛,徐杰.大曲中酿酒酵母的筛选与鉴定.食品与发酵工业,2013,39(6):1-5.
3.王仁君,贾磊,吕志超.不同培养基和条件对大曲酵母数量的影响.食品科技,2018,43(1):189-193.