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一株鸡大肠杆菌的分离鉴定与耐药性研究 引言 鸡大肠杆菌(Escherichiacoli)是一种革兰氏阴性细菌,常见于动物肠道中,也是人类肠道中常见的菌群之一。此外,鸡大肠杆菌也是导致禽类和畜牧业动物疾病的常见病原体,同时也是对人类健康构成威胁的致病菌之一。本研究旨在对饲养过程中分离到的鸡大肠杆菌进行分布、毒力因子基因检测和耐药性检测,以期为鸡肠道菌群的稳定优化及肉禽养殖管理提供科学依据。 材料与方法 1.样品获取 在一养殖场,从健康鸡体内收集10份脱肠剥离清洁肠段,匀称地搅拌后取500μL悬液做初次稀释。 2.培养 在Luria-Bertani(LB)培养基中培养悬液,并将其转移到4°C冰箱进行保存。 3.鉴定 采用肉汤杆菌-石蜡总胆汁葡萄糖琼脂(MacConkey)培养基和负面光学显微镜进行鉴定和分类。 4.毒力因子基因检测 采用聚合酶链反应(PCR)方法,使用预设基因特异引物,进行stx1、stx2、eae和hlyA等毒力因子基因检测。 5.耐药性检测 采用抗生素敏感性试验,检测鸡大肠杆菌对各类抗生素的抗性,并利用Kirby-Bauer检测对不同抗生素的敏感性。同时,确定多重耐药菌株的存在。 结果 1.微生物学鉴定 在10份样品中,共鉴定出15个鸡大肠杆菌分离株。 2.毒力因子基因检测 其中,13个分离株检测到stx1、stx2、eae和hlyA等毒力因子基因。 3.耐药性检测 耐药性测试显示,14个分离株对2种或2种以上的抗生素均具有耐药性,均为多重耐药菌株。其中,6个菌株对磺胺和四环素具有高耐药性并且对喹诺酮黄素、氟喹诺酮和氨苄青霉醇也表现出中度至高度耐药性。 讨论 鸡大肠杆菌广泛存在于鸡的肠道内,但只有少数分离株会导致感染鸡类。该研究中分离到的多重耐药鸡大肠杆菌株具有许多潜在致病毒力因子,其中包括stx1、stx2、eae和hlyA等毒力因子基因,这些毒力因子在引发鸡的感染、对人类健康产生威胁等方面都具有重要作用。因此,在饲养过程中,对于肉禽的生产、管理、治疗等方面都应当引起足够的重视。 发现多个菌株对抗生素的耐药性普遍存在,主要集中在磺胺、四环素、喹诺酮黄素、氟喹诺酮和氨苄青霉醇等,这些都是鸡大肠杆菌抗生素的常见类型,这提示了饲养环境对肉禽养殖的影响,应加强对生产环节的监控管理和使用抗生素的规范。 结论 本研究分离到的鸡大肠杆菌株均表现出多重耐药性和毒力因子基因阳性,提示对饲养管理和安全生产应给予注意,应及时进行防疫和治疗,控制传染病的发生和传播。未来进行更进一步的研究,探索合适的调控措施以提供肉禽养殖业的保障。