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蛹虫草菌丝液体发酵产纤溶酶的实验研究
摘要：本文以蛹虫草菌丝为原料，探究其在不同培养条件下产纤溶酶的可能性。实验结果表明，蛹虫草菌丝能够产生纤溶酶，并且在适宜温度、pH值、过氧化氢和硫酸铵浓度的条件下，纤溶酶的产量最高。本实验为深入了解蛹虫草菌丝的纤溶酶产生机制提供了有力的依据和参考，对于进一步深化该领域的研究和开发具有重要的意义。
关键词：蛹虫草菌丝；纤溶酶；发酵产生；培养条件
Introduction
纤溶酶是一种重要的蛋白酶，能够分解多种纤维素物质，具有广泛的应用领域，如造纸、纺织和生物质能源等。近年来，越来越多的研究者开始关注纤溶酶的生产和应用。目前，纤溶酶的主要生产方法是利用微生物进行发酵，其中以革兰氏阴性菌、真菌和链霉菌为主要生产菌种。蛹虫草是一种蓝色显微菌属中的一种真菌，其丝状体可以发酵产生多种酶类，包括蛋白酶、纤维素酶等，对于利用蛹虫草菌丝发酵生产纤溶酶也具有一定的研究价值。
Materialsandmethods
实验中采用新鲜蛹虫草菌丝为原料，进行液态发酵实验。首先将蛹虫草菌丝分别切割成约1cm长的小段，然后在洁净的培养基中进行预培养。预培养的培养基成分为（每升含量）：葡萄糖10g，酵母粉5g，蛋白胨5g，NaCl5g，MgSO40.5g，K2HPO42g，KH2PO42g，FeSO4•7H2O5mg，pH调节至7.0。预培养条件为温度28℃，恒温振荡培养6d，期间每隔24h观察并记录生长情况。
预培养完成后，将小段蛹虫草菌丝均匀地分配到各个试验瓶中，然后添加液态培养基，培养基成分与预培养相同。实验瓶放入恒温摇床中摇床培养器，不停地摇动，调整摇床转速为150r/min，培养条件为pH7.0、温度28℃、发酵时间为5d。实验过程中，每天测定一次液相培养物的pH值、悬浮物和纤溶酶的活力。纤溶酶活力的测定采用Congo红法，活力单位为U/mL。
Results
在不同的发酵条件下，蛹虫草菌丝可以分泌出纤溶酶。在温度、pH值、过氧化氢和硫酸铵浓度等条件的优化下，纤溶酶的产量达到最大。
(1)温度的影响：实验中分别设置了28℃、30℃、32℃和34℃四个温度条件，结果显示，28℃的温度条件下纤溶酶的产量最高，为51.8U/mL。
(2)pH值的影响：实验中分别设置了pH为6.0、7.0、8.0、9.0四种不同的pH值条件下，结果显示pH为7.0的条件下纤溶酶的产量最高，为65.3U/mL。
(3)过氧化氢的影响：实验中分别设置了0.1、0.3、0.5和0.7mmol/L的过氧化氢浓度，结果显示当浓度为0.5mmol/L时纤溶酶的产量最高，为69.4U/mL。
(4)硫酸铵的影响：实验中分别设置了0、2、4和6g/L的硫酸铵浓度，结果显示当浓度为4g/L时纤溶酶的产量最高，为72.1U/mL。
Conclusion
本实验中利用蛹虫草菌丝进行液态发酵，得出在温度28℃、pH值为7.0、过氧化氢浓度为0.5mmol/L和硫酸铵浓度为4g/L的最佳条件下，纤溶酶的产量最高，达到72.1U/mL。本实验为深入了解蛹虫草菌丝的纤溶酶产生机制提供了有力的依据和参考，对于进一步深化该领域的研究和开发具有重要的意义。