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第十章核酸的酶促降解和核苷酸代谢核酸酶实质是磷酸二脂酶。 根据酶对底物的专一性分为:核糖核酸酶、脱氧核糖核酸酶、非特异性核酸酶。 根据酶的作用方式分:内切酶、外切酶。一、核糖核酸酶只能水解DNA磷酸二酯键的酶。 牛胰脱氧核糖核酸酶(DNaseⅠ),可切割双链和单链DNA,降解产物为3’-磷酸为末端的寡核苷酸。 限制性核酸内切酶:细菌体内能识别并水解外源双链DNA的核酸内切酶,可特异切割外源DNA特定序列中的磷酸二脂键(对碱基序列专一),切断双键,常作为工具酶。 限制性内切酶类型产生3ˊ-OH和5ˊ-P的末端既可水解RNA,又可水解DNA磷酸二酯键的核酸酶。 小球菌核酸酶(内切酶),可作用于RNA或变性的DNA,产生3’-核苷酸或寡核苷酸。 蛇毒磷酸二酯酶和牛脾磷酸二酯酶(外切酶)。蛇毒磷酸二酯酶能从RNA或DNA链的游离的3’-OH逐个水解,生成5’-核苷酸。 牛脾磷酸二酯酶从游离的5’-OH开始逐个水解,生成3’核苷酸。第二节核苷酸的生物降解一、核苷酸的降解2、核苷磷酸化酶 不同生物降解的产物不同 (人类和灵长类动物)尿囊酸酶三、嘧啶的降解一、嘌呤核苷酸的生物合成(1)嘌呤环上各原子的来源IMP的合成是从5-磷酸核糖开始的,先于ATP反应生成5’-磷酸核糖-1’-焦磷酸(PRPP),然后嘌呤环的各原子在PRPP的C-1位置上逐渐加上去。5-P核糖 5-磷酸核糖+CO2+甲川THFA+甲酰THFA+2Gln+Gly+Asp+5ATP→ IMP+2THFA+2Glu+延胡索酸+4ADP+1AMP+4Pi+PPi(3)IMP转变为GMP和AMP嘌呤核苷+磷酸腺嘌呤在核苷磷酸化酶作用下转化为腺嘌呤核苷,后者在腺苷激酶的作用下与ATP反应,生成腺嘌呤核苷酸。与嘌呤核苷酸合成不同,在合成嘧啶核苷酸时,首先合成嘧啶环,再与磷酸核糖结合,生成尿嘧啶核苷酸,最后由尿嘧啶核苷酸转化为胞嘧啶核苷酸。(1)嘧啶环上各原子的来源(2)尿嘧啶核苷酸的合成尿嘧啶核苷三磷酸可直接与NH3(细菌)或Gln(动物)反应,生成胞嘧啶核苷三磷酸。嘧啶碱与1-磷酸核糖生成嘧啶核苷,然后由尿苷激酶催化尿苷和胞苷形成UMP和CMP。脱氧核糖核苷酸是由相应的核糖核苷酸衍生而来的。 (1)核糖核苷酸的还原反应由尿嘧啶脱氧核苷酸(dUMP)经甲基化生成。Ser提供甲基,NADPH提供还原当量。胸腺嘧啶核苷酸合成酶四氢叶酸是一碳的载体,参与嘌呤核苷酸和胸腺嘧啶脱氧核苷酸的合成。 氨基蝶呤、氨甲蝶呤是叶酸的类似物,能与二氢叶酸还原酶不可逆结合,阻止FH4的生成,从而抑制FH4参与的一碳单位的转移。可用于抗肿瘤。三、核苷酸合成总结一、名词解释 酰氨平面、别构效应、结构域、 主动运输、辅基、Tm 二、简答 1、简述蛋白质含量测定的3种方法及原理 2、比较蛋白质α-螺旋中的氢键和DNA双螺旋中的氢键,并指出氢键在稳定这两种结构中的作用。 3、DNA双螺旋一条链序列是GGATCGAAC,请写出其互补链序列。