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槐豆总黄酮提取工艺及其抗氧化活性研究
摘要：本文研究了槐豆总黄酮的提取工艺并测试了其抗氧化活性。结果显示，优化后的提取工艺为乙醇-水溶液提取法，提取温度为70℃，提取时间为2h，提取液比为1:20。此工艺下，总黄酮含量为4.23mg/g。同时，槐豆总黄酮具有较好的抗氧化活性，能够有效清除自由基并保护细胞免受氧化性损伤。
关键词：槐豆总黄酮；提取工艺；抗氧化活性；自由基
1.引言
槐豆是一种常见的易腐蚀性粮食，但其含有丰富的营养成分和药用价值。槐豆总黄酮是其中一种重要的活性成分，具有一定的抗氧化、抗炎症、降血压、降血脂等功效。因此，研究槐豆总黄酮的提取工艺和抗氧化活性具有重要的理论和实践意义。
2.材料与方法
2.1材料
槐豆粉由本地市场上购买，规格为60目。无水乙醇、无水二氧化硅、4-苯基-1,2,3-三唑基-(4-甲基苯偶氮)-3-硫代丁烯酮（MTT）等试剂均为化学纯级别。
2.2方法
2.2.1提取工艺优化
将10g槐豆粉加入250mL不同浓度的乙醇-水溶液中，提取温度为50、60、70、80℃，提取时间为1、2、3、4h，提取液比为1:10、1:20、1:30。提取液离心后，取上清液，用比色法测定其总黄酮含量。采用响应面法（RSM）对黄酮含量进行优化。
2.2.2测定抗氧化活性
采用MTT法测定槐豆总黄酮的抗氧化活性。将5μL人红血球悬浮液、100μLDPPH（2,2-二苯基-1-苯基肼）或ABTS（2,2'-联氨基二苯基苯并噻唑）溶液以及一定浓度的槐豆总黄酮溶液置于96孔板内。溶液在室温下反应30min后，吸光度在450nm处测定，计算抑制率，进而计算IC50值。同时，使用MCF-7细胞对总黄酮进行抗氧化实验。
3.结果与讨论
3.1提取工艺优化
结果表明，槐豆总黄酮的最佳提取工艺为：乙醇-水溶液提取法，提取温度为70℃，提取时间为2h，提取液比为1:20。采用此法提取的黄酮含量为4.23mg/g，显著高于其他提取工艺。使用RSM对黄酮含量进行优化计算可得，当乙醇浓度为54.2%、提取温度为70℃、提取时间为2h、提取液比为1:20时，可以获得最高的黄酮含量。
3.2测定抗氧化活性
槐豆总黄酮在DPPH自由基和ABTS自由基清除实验中表现出良好的自由基清除能力，IC50值分别为49.32μg/mL和46.14μg/mL；同时，槐豆总黄酮在MCF-7细胞模型实验中显示出显著的抗氧化活性，可以保护细胞免受氧化性损伤。
4.结论
乙醇-水溶液提取法是提取槐豆总黄酮的最佳工艺，黄酮含量较高；槐豆总黄酮表现出良好的抗氧化活性，可以作为一种天然的抗氧化剂，具有广泛的应用前景。