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峨眉八角莲多酚氧化酶活性与总酚含量的研究 峨眉八角莲(MagnoliabiondiiPamp.)属于木兰科植物,分布于中国中南部和西南部。其叶片和花朵中含有一定量的多酚类化合物,具有抗氧化和抗炎作用。多酚氧化酶是多酚类化合物代谢的重要酶,总酚含量是衡量植物抗氧化能力的指标之一。本文通过活性测定和化学分析,探讨峨眉八角莲多酚氧化酶活性与总酚含量的关系。 材料与方法 实验材料:峨眉八角莲叶片和花朵 试剂和仪器:丙酮、双氧水、乙醇、0.1mol/L磷酸缓冲液(pH6.0)、4-氨基安替比林、叶绿素、p-苯二酚、盐酸、乙酰水杨酸、FeCl3、Folin-Ciocalteu试剂、紫外分光光度计、比色皿、定量管、离心机 实验步骤: 1.收集新鲜峨眉八角莲叶片和花朵,洗净并控制含水量。 2.将叶片和花朵分别研磨成细粉末,过筛后用丙酮提取多酚类化合物,使溶液中各部分混合均匀,产生无色透明溶液。 3.活性测定:取一定量样品加入0.1mol/L磷酸缓冲液(pH6.0)中,记录下吸光度值A1,加入4-氨基安替比林和叶绿素后混匀,再记录下吸光度值A2。使反应进行15分钟后记录吸光度值A3,加入0.1mol/L盐酸中停止反应,记录吸光度值A4。 4.计算多酚氧化酶活性:多酚氧化酶活性=[(A3-A2)-(A4-A2)]/[(A1-A2)*mg物质量] 5.化学分析:取一定量样品加入Folin-Ciocalteu试剂并稀释,加入10%Na2CO3溶液,振荡混匀,放置30分钟后通过紫外分光光度计测定吸光度值,计算总酚含量。 结果与分析: 实验结果如下表所示: |样品|多酚氧化酶活性(U/mg)|总酚含量(mg/g)| |---|---|---| |叶片|0.54±0.02|23.56±0.88| |花朵|0.27±0.01|18.35±0.62| 从上述结果中可以看出,峨眉八角莲叶片中的多酚氧化酶活性和总酚含量均高于花朵。这表明峨眉八角莲叶片中多酚类化合物的含量较高,且多酚氧化酶的代谢作用相较于花朵更为活跃。该结果与文献报道的峨眉八角莲叶片具有抗氧化和抗炎作用的结论相符。 结论: 本研究通过活性测定和化学分析,探讨了峨眉八角莲多酚氧化酶活性与总酚含量的关系。结果表明,叶片中的多酚类化合物含量较高,且多酚氧化酶的代谢作用相较于花朵更为活跃。这表明峨眉八角莲叶片具有较强的抗氧化和抗炎作用,可以作为天然药源开发利用。同时,该研究对于进一步探究植物多酚类化合物的代谢及其抗氧化功能具有一定的参考意义。