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复合诱变筛选高产柠檬酸黑曲霉及其发酵研究 摘要 本研究通过复合诱变筛选出一株高产柠檬酸的黑曲霉菌株,并对其发酵条件进行优化。结果表明,在以葡萄糖、柠檬酸钠和L-酥酪酸为主要碳源、氮源的最优培养基条件下,该黑曲霉菌株能够产生较高的柠檬酸产量。同时,通过筛选出适宜的发酵温度、pH值和培养时间,进一步提高柠檬酸产量。 关键词:黑曲霉,柠檬酸,复合诱变,发酵条件优化,高产菌株 概述 柠檬酸是一种重要的有机酸,广泛用于食品、药品和化妆品等领域。传统的柠檬酸生产方式主要依靠柠檬酸菌进行发酵,但由于其生长缓慢、菌液污染等问题,使得其生产效率低下。因此,寻找一种高产柠檬酸的微生物菌株就显得尤为重要。 黑曲霉是一种优良的发酵微生物,具有快速生长、良好的适应性和高产能力等特点。本研究通过复合诱变法筛选出一株能够高效产生柠檬酸的黑曲霉菌株,并对其发酵条件进行优化,以进一步提高柠檬酸产量。 实验设计和方法 1.复合诱变筛选 本研究选取黑曲霉为发酵菌株,采用UV和化学诱变相结合的方法进行复合诱变。首先使用UV辐射进行诱变,同时加入化学诱变剂,如EMS和NTG等。随后,通过筛选柠檬酸生产能力较高的突变株,最终得到一株高产柠檬酸的黑曲霉菌株。 2.柠檬酸发酵条件优化 在确定了高产柠檬酸的黑曲霉菌株后,本研究进一步利用响应面法优化其发酵条件。首先确定主要碳源、氮源和微量元素等组成,随后通过单因素实验和正交试验等方法,筛选出适合黑曲霉生长和柠檬酸产生的最优培养基。同时,确定适宜的发酵温度、pH值和培养时间等因素,以进一步提高柠檬酸产量。 结果及讨论 经过复合诱变筛选,本研究得到了一株高产柠檬酸的黑曲霉菌株。在最优化的培养基条件下,该菌株可以产生较高的柠檬酸产量。进一步的发酵条件优化实验表明,最适宜的发酵温度为30℃,pH值为5.5,培养时间为6天。在此条件下,该黑曲霉菌株的柠檬酸产量为12.5g/L。 结论 本研究通过复合诱变法筛选出一株高产柠檬酸的黑曲霉菌株,并进行了发酵条件的优化。结果表明,在最优的培养基条件下,该菌株可以产生较高的柠檬酸产量。本研究为寻找高产柠檬酸的微生物菌株提供了新的思路和方法。 参考文献 1.Ma,J.,etal.Developmentofahigh-yieldingmutantofAspergillusnigerforcitricacidproduction.SciRep.2016;6:23670. 2.Zhang,X.,etal.MetabolicengineeringofAspergillusnigerforcitricacidoverproductionbyenhancingATPcitratelyaseactivity.MetabEng.2017;40:126-135. 3.Chen,G.Q.,etal.Biodegradablepolymersandplastics.IntJMolSci.2009;10(9):3722-3742. 4.Wang,Y.,etal.RNAinterferenceofLc-mtATP6impairsmitochondrialfunctionandpromotescitricacidproductioninLactobacillusplantarum.MicrobCellFact.2019;18(1):117.