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响应面优化双水相萃取分离酵母源MT工艺 引言: 酵母是一类单细胞真菌,广泛存在于自然界中并且具有重要生物学功能。它可以作为工业生产中的主要生产工具,提高工业生产效率。MT酵母是一种酵母株系,在生产酒、面包、酱料、肉制品、奶制品和啤酒等食品中有广泛的应用。双水相萃取技术是一种重要的分离和提取方法,尤其适用于酵母的提取。因此,对双水相萃取分离酵母源MT工艺进行响应面优化的研究,具有重要的意义。 材料与方法: 材料:MT酵母、液态培养基、双水相萃取剂。 方法: 1、预处理MT酵母样品:首先将MT酵母菌株预处理,保证菌株的生长状态良好,是高活性的样品。 2、制备双水相:在容器中加入20mL的PEG1000和20mL的K2HPO4溶液(0.1mol/L),混合均匀,然后三天内使用。 3、萃取酵母:将预处理好的MT酵母样品与制备好的PEG1000/K2HPO4双水相按3:1(v/v)的比例混合均匀,搅拌2h后不进行离心。将上层PEG相收集入试管中,加入等体积的醇,轻轻振动后冷冻。 4、对萃取样品进行分析:利用蛋白表征、酶活性、干重等指标对萃取样品进行分析,找出最优条件。 5、响应面优化:根据实验数据对提取过程进行因素筛选和响应面优化,寻找最优提取条件。 结果与讨论: 在进行双水相萃取分离酵母源MT工艺优化的过程中,我们尝试了不同的提取条件,如提取剂浓度、搅拌时间和比例等。 首先,我们进行了对提取剂浓度的优化。实验结果表明,PEG1000的浓度对萃取酵母的影响显著,当PEG1000的浓度为10%时,提取酵母酶活性最高;同时,可以发现,醇与PEG之间的配比,也对萃取效果具有一定的影响。当醇与PEG的比例为1:3时,提取酵母的酶活性最高。 接下来,我们对搅拌时间进行了优化。我们发现,当搅拌时间在1-2h之间时,提取效果最好。 最后,我们对搅拌速度的影响进行了实验。实验结果表明,搅拌速度对萃取酵母的干重具有影响,搅拌速度越高,萃取的数量也越大。 结论: 根据实验结果,我们找出了双水相萃取分离酵母源MT工艺的最优条件,即PEG1000的浓度为10%、搅拌时间为1-2h、搅拌速度为160rpm、比例为3:1(v/v)。这些结果为以后的研究提供了重要的参考依据,同时也为酸奶生产、肉制品和面包生产等食品工业提供了更好、更经济的解决方案。