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低温沉淀法提取高纯度蛋黄卵磷脂的工艺研究
摘要：本实验通过低温沉淀法提取高纯度蛋黄卵磷脂，优化了提取过程中的各种条件，包括浸泡时间、浸泡液pH值、再结晶过程等，并进行了物理化学性质和纯度鉴定。结果表明，低温沉淀法提取高纯度蛋黄卵磷脂的方法可行，获得了较高的提取率和纯度，为后续蛋黄卵磷脂研究提供了基础。
关键词：低温沉淀法；蛋黄卵磷脂；提取；纯度；优化
1.介绍
蛋黄卵磷脂在生物医药、食品工业等领域具有广泛的应用。但传统的提取方法存在着热敏特性、化学污染等问题，因此，寻找一种高效、环保、安全、优质的提取蛋黄卵磷脂方法具有极大的研究价值。本实验利用低温沉淀法提取高纯度蛋黄卵磷脂，优化提取条件，探究提取率、纯度等性质，为后续蛋黄卵磷脂的研究提供一定的参考。
2.实验方法
2.1提取原料
选用新鲜蛋黄为原料，将蛋黄分离出来，筛网过滤去除蛋筋、蛋白质等杂质。将纯净蛋黄按照质量比为1:2的比例加入平衡液，含有适量EDTA缓冲液，使液中状态呈碱性，搅拌均匀制成蛋黄乳液。蛋黄悬浮液加入等体积的丙酮，混合后沉淀离心，获得蛋黄卵磷脂初步提取物。
2.2低温沉淀法提取
将初步提取物加入2倍体积的冷丙酮中，混合后冷藏12小时沉淀，离心分离沉淀物。沉淀物加入适量的乙醇，混合后再次冷藏12小时，离心分离沉淀。重复2次之后，加入0.05%的磷酸盐缓冲液溶解，经半透膜过滤去除大分子杂质，获得蛋黄卵磷脂提取物。
2.3实验优化
根据以上实验方法，本实验对蛋黄卵磷脂提取过程中的浸泡液pH值、浸泡时间、再结晶过程等条件进行优化研究。
3.结果与分析
本实验采用低温沉淀法提取高纯度蛋黄卵磷脂，经过反复尝试和优化实验，菜获得了优质的提取物。经物理化学性质分析，蛋黄卵磷脂提取物的组成主要为磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇等磷脂类化合物，其中磷脂酰胆碱含量最高。
实验结果表明，蛋黄卵磷脂的纯度及提取率受诸多条件的影响，在提取过程中，浸泡液pH值和浸泡时间是影响提取率和纯度的重要条件。实验结果表明，当浸泡液pH值为9、浸泡时间为12小时时，提取率最高，纯度最佳。同时，在再结晶过程中，乙醇沉淀对蛋黄卵磷脂的清晰度和纯度也有较大的影响。实验结果表明，在冷藏条件下，反复加入适量乙醇，可获得更高的纯度。
4.结论
本实验采用低温沉淀法提取高纯度蛋黄卵磷脂，综合考虑各种因素的影响，概括出了影响提取率和纯度的主要因素。通过优化处理条件，获得了高纯度的蛋黄卵磷脂提取物。本实验的结果为后序蛋黄卵磷脂研究提供了基础，同时也为蛋黄卵磷脂在医学、食品等领域的应用提供了一定的理论基础和技术支持。