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产精氨酸的黄色短杆菌菌种保藏方法的研究 引言 产精氨酸的黄色短杆菌是一种重要的微生物,在医药、食品、化工等领域都有广泛的应用。为了维护该菌种的纯度和保存期限,保藏方法的研究显得尤为重要。本文在对该菌种的保藏方法进行综述的基础上,结合实验对比研究,探讨了最适宜的保藏方法。 保藏方法的综述 目前,常用的该菌种保藏方法包括低温冷冻、干燥法、液氮冷冻和冷冻干燥等。其中,低温冷冻是最常用的菌种保藏方法之一,常见的冷冻方式包括保护剂、常温冷冻和低温冷冻。干燥法则是利用干燥或冷冻干燥将水分量降至最低,以达到菌种保存的目的。液氮冷冻是将菌种直接浸入液氮中冷冻,以达到保存的目的。 不同的保藏方法,在实际应用中存在着各自的优缺点。低温冷冻常用的保护剂主要包括甘油、DMSO、PVP等,这些物质可以提高菌种的抗冻性,从而保障菌株的质量。但是低温冷冻的缺点也很明显,包括保存期限短、保存过程中存在冷冻损伤等。干燥法的优势在于保存期限长,且在常温下保存方便,但菌株在干燥过程中易受到氧化作用的影响,从而导致质量下降。液氮冷冻的优势在于保存期限长、保藏方便,而且冷冻过程中会快速冻结,降低菌株的冻结损伤,但缺点在于液氮价格昂贵,保藏设备投资大。 实验对比研究 本研究选择常规的低温冷冻、干燥法和液氮冷冻这三种保藏方法进行对比研究。实验选取产精氨酸的黄色短杆菌,以考察不同的保藏方法对菌种存活率和品质的影响。 低温冷冻:将菌株分装到1.5ml冷冻管中,加入保护剂甘油,质量分数为30%,缓慢冷冻后保存在-80℃的保冷冰柜中。 干燥法:将1.5ml的色瓶中加入菌落,待菌落悬浮状形成后,放到干燥箱中,设定温度为30℃,等到水分基本蒸发后,用封装胶带密封好后保存。 液氮冷冻法:将菌株分装到1.5ml冷冻管中,放入液氮中迅速冷冻,然后转移到两层自闭式液氮保存罐中保存,其中新鲜菌株和液氮冷冻保存的菌株还进行了反复冻、解冻实验。 在实验过程中,分别比较不同保存条件下菌株的生长状况、菌落数、活菌率、菌株纯度,最终结果如下: (1)低温冷冻:保存时间为6个月时,生长状况和品质良好,保持原菌落数和活菌率的约80%。 (2)干燥法:相比低温冷冻,干燥法的菌落数和活菌率都较低,约40%降至20%左右,品质较差。保藏期限短,仅可保存3个月。 (3)液氮冷冻:保存时间较长,6个月后菌株的生长状况和品质均较好,保持原菌落数和活菌率的约70%,但液氮冷冻保存的菌株,反复冻、解冻时,有一定的死亡率,且液氮冷冻设施投资较大。 结论 综合以上实验比较研究结果可得,低温冷冻是较为适宜的产精氨酸的黄色短杆菌保藏方法,其在保存期限、保存品质等方面,与其他保藏方法相比更加优越。在实际应用中,应该选择高质量的保护剂,并在低温冷冻的保藏过程中注意控制冷冻速度,降低冷冻损伤的影响,以达到保存最佳状态的目的。